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源自番茄斑枯病病毒的病毒沉默抑制剂 NSs 的体内瞬时表达降低了昆虫 RNAi 的效率
番茄斑萎病毒是一种单链 RNA 病毒,可引起严重的植物病害。它的水平传播取决于一些蓟马物种,比如 Frankliniella occidentalis。其基因组编码一种非结构蛋白nonstructural (NSs),作为一种沉默抑制因子,其通过在植物宿主中使用 RNA 干扰(RNAi)来保护抗病毒免疫,这在致病性中起关键作用。然而,其作为沉默抑制因子的生理功能在昆虫载体中并未得到很好的阐明。
本研究通过 NSs 表达评估了其他两种昆虫系统中 RNAi 效率的变化。为此,将该基因克隆到真核表达载体中,并通过体内瞬时表达(IVTE)在两种不同的昆虫物种中瞬时表达。在将重组构建体喂给无毒的西花蓟马后,在蓟马中观察到 NSs 表达超过 2 天(图 1)。
图 1. 番茄斑萎病毒 NSs 基因在 Frankliniella occidentalis 中的体内瞬时表达 (IVTE) 和随后的 RNAi 抑制
在 NS 的这种表达下,蓟马从对 v-ATP 酶特异的有毒双链 RNA 的处理中解救出来。有趣的是,用 IVTE 处理的蓟马显著抑制了 SID 和 Dicer-2 等 RNAi 通路核心基因的表达。将表达 NSs 的重组载体注射到非载体昆虫 Spodoptera exigua 幼虫中。通过 IVTE 表达 NSs 的幼虫非常容易感染称为 iflavirus 的 RNA 病毒(图 2)。
图 2. 番茄斑枯病病毒 NSs 基因在 Spodoptera exigua 中的体内瞬时表达和随后的 RNAi 抑制
这些表明 NS 在昆虫中充当沉默抑制因子,可用作 RNA 病原体控制害虫的增效剂。
原文链接:
https://doi.org/10.1002/arch.21982
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