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摩门螽斯 RNAi 防治方法的开发
摩门螽斯(Anabrus simplex)原产于美国,是重要的极具破坏力的牧场害虫。这些昆虫可以形成数以百万计的迁徙带,可以穿越美国西部,破坏农作物,入侵城市地区,并在道路上产生危险的浮油(图 1)。
图 1. 2020 年爱达荷州摩门教蟋蟀大爆发
目前针对这种害虫的防治方法主要是针对性地应用非特异性化学杀虫剂,这对环境产生严重的负面影响。在这项研究中,我们迈出了开发 RNA 干扰 (RNAi) 方法的第一步,这是一种具有害虫管理潜力的基因沉默技术,用于摩门螽斯作为传统广谱杀虫剂的潜在替代品。首先为摩门螽斯进行了从头转录组测序,获得了 7 个具有沉默效应的管家基因的 dsRNA(图 2)。
图 2. EF1、GAPDH、Hsp70 和 RpL5 靶基因的时程分析
然后,使用这些 dsRNA 对 RNAi 效率和击倒时间过程进行了表征,并评估了它们诱导死亡的能力。已经证明可以通过注射在摩门螽斯中引发 RNAi 反应,但敲低效率和 RNAi 反应的时间过程因靶基因和组织类型而异(图 3)。
图 3. 不同组织中的敲除效率测定
研究还表明,敲低效率差的原因之一可能是血淋巴中存在 dsRNA 降解酶(图 4)。
图 4. 血淋巴的 dsRNA 降解测定
这些结论表明,RNAi 作为一种防治方法,在摩门螽斯中是可能的,但需要做更多的工作才能有效地将其用作种群管理方法。
原文链接:
https://doi.org/10.3390/insects13080739
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