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小地老虎几丁质家族基因的鉴定及RNAi功能分析

已有 1885 次阅读 2022-7-21 09:49 |系统分类:科研笔记

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小地老虎几丁质家族基因的鉴定及RNAi功能分析

几丁质是昆虫细胞外基质的主要成分,其代谢在很大程度上影响昆虫的发育和蜕皮。几丁质酶是昆虫体内重要的降解酶,由多个大小、表达模式和功能不同的基因编码。然而,目前对小地老虎中不同几丁质酶的功能了解较少,阻碍了我们应用新技术将这些基因作为新的害虫管理策略。

在该研究中,从A.ipsilon转录组中发现了11个几丁质酶基因的全长互补DNA序列。虽然这些几丁质酶的结构域差异很大,但它们都包含至少一个几丁质酶催化结构域。

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图 1. 五种昆虫几丁质酶的系统发育分析

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图 2. 小地老虎几丁质酶的结构域分析


发育阶段和组织依赖性表达谱表明,大多数AiCht在蛹期表达最高。此外,AiCht2AiCht6AiCht7AiCht10主要在外皮中表达,而AiCht8AiCht-h在中肠中的表达最高。

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图 3. 11个AiCht基因的发育表达模式分析

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图 4. 11个AiCht基因的组织表达模式分析

RNAi实验表明,敲除AiCht10或生长因子相关基因(AiIDGF)会导致较高的幼虫死亡率。

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图 5. 11个AiCht基因RNAi抑制后对小地老虎的致死率分析


注射以AiCht10为靶点的dsRNAdsAiCht10)后,幼虫在蜕皮过程中未能脱落旧角质层,而注射以AiIDGF为靶点的dsRNAdsAiIDGF)后,幼虫体收缩并变黑。

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图 6. AiCht10AiIDGF基因RNAi后对幼虫发育的影响


该研究结果首次揭示了AiCht10AiIDGF在小地老虎中的重要作用。这些基因对幼虫发育至关重要,有可能成为基于RNAi的害虫管理的新靶点。

原文链接:

https://doi.org/10.1002/ps.7047



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