褐飞虱侧输卵管分泌蛋白可以作为RNAi的新靶点

输卵管在动物生殖过程中起着至关重要的作用，是卵子运输的关键管道。虽然高等动物的输卵管分泌已有很好的记录，但昆虫输卵管分泌的蛋白质组学信息仍知之甚少。

输卵管是雌性生殖系统的“交通枢纽”，是卵子运输的关键管道。通过LC-MS/MS蛋白质组检测和转录组分析，鉴定了80种侧输卵管分泌蛋白。

图 1. 雌性褐飞虱的生殖系统

并鉴定了5个基因（NlOdsp、NlOdsp1、NlOdsp2、NlOdsp3和NlOdsp4）在水稻害虫褐飞虱的输卵管中特异性表达。

图 2. 雌性褐飞虱NlOdsp和NlOdsp1–4蛋白质的示意图

qRT-PCR分析表明，这些基因和蛋白质主要在成虫雌性生殖系统中特异表达。

图 3. NlOdsp和NlOdsp1–4基因的时空表达模式分析

针对5个NlOdsp基因的RNAi实验表明，注射dsRNA，抑制该基因，8天后，雌性成虫的存活率（对照的3.4%-68.7%）和生殖力（对照的3.9%-57.6%）显著降低。

图 4. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因对褐飞虱存活率的影响

图 5. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因对褐飞虱雌性的生殖力和孵化率影响

此外，抑制NlOdsp1导致侧输卵管内凝胶状棕色分泌物减少，而dsNlOdsp2组的分泌物增加。

图 6. RNAi抑制NlOdsp1–4基因6天后雌性的输卵管表型

此外，NlOdsp3是一个多效性基因，参与卵母细胞发育和卵子通过侧输卵管的运动，类似于NlOdsp在卵子运输中的作用。

图 7. dsNlOdsp3注射后对雌性褐飞虱的影响

图 8. RNAi处理抑制基因后侧输卵管组织学横截面的全景图像

该结果加深了我们对雌性昆虫输卵管分泌蛋白的理解，并为基于RNAi的害虫防治提供了新的靶基因。

原文链接：

https://doi.org/10.1016/j.jprot.2022.104670