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利用植物根部浸泡dsRNAs进行白栎害虫特异性RNAi基因沉默的可行性
dsRNA在诱导宿主特异性基因敲除和致死方面的功效已在许多昆虫中得到证实,并且dsRNA正被整合用于各种农业和园艺作物的害虫抑制。
然而,尽管证明了多种森林害虫对RNAi的易感性,但对其在森林环境中的使用关注较少。在实施森林害虫抑制之前,必须对dsRNA在环境中的特异性、有效性和行为进行验证。
因此,该研究利用外源dsRNA对在经济和生态上具有重要意义的阔叶树水培进行研究。将白栎(Quercus alba,L.)幼苗根部浸泡于dsRNAs中,并在浸泡后1、3、5和7天对其进行破坏性取样,分为茎和叶组织,并提取RNA。
图 1. dsRNA浸泡幼苗示意图
凝胶电泳观察处理过的幼苗材料中是否存在外源dsRNA,Sanger测序用于进一步验证处理过的dsRNA的回收率。
图 2. 凝胶电泳检测材料中dsRNA的存在情况
这两种技术都证实了在每个样本间隔的每种组织类型中都存在外源性应用的dsRNA,证明了dsRNA通过白橡树组织的成功摄取和转移。
图 3. Logistic回归模型分析经dsGFP处理的橡树幼苗叶片和茎组织中的dsRNA含量
该研究结果支持根系吸收作为硬木幼苗中dsRNA的一种可行的传递方法,它可以为单株树木提供保护,防止某些取食树木的害虫或病原体。
原文链接:
https://doi.org/10.3389/fpls.2022.830226
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