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罗丹明类染料是一种膜渗透性的阳离子荧光探针 |MedChemExpress (MCE)

已有 165 次阅读 2024-11-11 09:41 |系统分类:科研笔记

TMRM Perchlorate | 四甲基罗丹明甲酯高氯酸盐

MCE 国际站:TMRM Perchlorate

品牌:MedChemExpress (MCE)

CAS:115532-50-8

纯度:99.69%

分子式:C₂₅H₂₅ClN₂O₇

分子量:500.93

存储条件: 4°C,密封保存,防潮,避光

运输条件:美国大陆的室温;其他地区可能有所不同。

产品活性:罗丹明类染料是一种膜渗透性的阳离子荧光探针,可对线粒体膜电位进行特异性识别,从而附着在线粒体中,并产生明亮荧光,在一定浓度下,罗丹明类染料对细胞具有低毒性,因此普遍用于检测动物细胞、植物细胞以及微生物中的线粒体。

生物活性:罗丹明染料是一种可透过膜的阳离子荧光探针,能够特异性地识别线粒体膜电位,从而附着在线粒体上并产生明亮的荧光,且在一定浓度下罗丹明染料对细胞的毒性较低,因此常用于检测动物细胞、植物细胞和微生物中的线粒体[1]。

体外:1.TMRM 工作液的配制 1.1 储备液的配制取 1mg TMRM 溶于 525 uL DMSO 中,得到 5 mM 储备液。1.2 TMRM 工作液的配制用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,得到 1 -20 μM 工作液。注意:请根据情况调整TMRM 工作液的浓度。 2. 细胞染色 2.1 悬浮细胞(6 孔板) a.1000g 4℃ 离心 3-5 分钟,弃上清。PBS 洗 2 次,每次 5 分钟。细胞密度为 1×106/mL。加入1 mL工作液,室温孵育5-30分钟。 400g 4℃离心3-4分钟,弃清。 PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。重悬细胞用无血清细胞培养基或PBS。荧光显微镜或流式细胞仪观察。 2.2 贴壁细胞 a.在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 b.从培养基中取出盖玻片并吸出多余的培养基。加入100 μL 工作液,轻摇使其完全覆盖细胞,然后室温孵育30-60 分钟。用培养基洗涤2 次,每次5分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。注:若采用流式细胞仪检测,细胞需重悬后再染色。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。 0 --> TMRM 高氯酸盐 相关抗体:Sudan I Antibody (YA905)

细胞实验:将培养物暴露于含有 TMRM 高氯酸盐的 Millipore 过滤溶液 (0.22 µm) 中,温度为 37°C,持续 1 小时(实验涉及暴露于 TMRM 高氯酸盐的时间不同除外)。处理后,在无菌条件下除去溶液并重新应用培养基,然后将培养物在 37°C 下后孵育 18 小时(实验涉及暴露后不同时间点的分析除外)。然后在室温下用 2 mg/mL 双苯甲酰亚胺对细胞染色 20 分钟。随后用盐水清洗盖玻片,并使用 2P 显微镜成像。凋亡细胞在紫外线激发下被识别为亮荧光细胞核,表明 DNA 碎片化。细胞存活率计算为每次处理 5 个显微镜视野中未染色的活细胞百分比(±SD)[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

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参考文献:[1]. Chowdhury SR, et al. Simultaneous evaluation of substrate-dependent oxygen consumption rates and mitochondrial membrane potential by TMRM and safranin in cortical mitochondria. Biosci Rep. 2015 Dec 8;36(1):e00286.

[2]. Monteith A, et al. Imaging of mitochondrial and non-mitochondrial responses in cultured rat hippocampal neurons exposed to micromolar concentrations of TMRM. PLoS One. 2013;8(3):e58059.

[3]. Crowley LC, et al. Measuring Mitochondrial Transmembrane Potential by TMRE Staining. Cold Spring Harb Protoc. 2016 Dec 1;2016(12):pdb.prot087361.

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