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CFDA-SE 是一种可穿透细胞膜的荧光染料 |MedChemExpress (MCE)

已有 116 次阅读 2024-11-7 09:40 |系统分类:科研笔记

​CFDA-SE | 5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯

MCE 国际站:CFDA-SE

品牌:MedChemExpress (MCE)

CAS:150347-59-4

纯度:99.01%

分子式:C₂₉H₁₉NO₁₁

分子量:557.46

存储条件:-20℃,密封保存,防潮,避光

运输条件:美国大陆的室温;其他地区可能有所不同。

产品活性:CFDA-SE 是一种可穿透细胞膜的荧光染料,其能与胞内细胞骨架蛋白中的游离胺基反应,最终形成具有荧光的蛋白复合物。该染料进入细胞后主要定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的染色效果最强。CFDA-SE 染料可用于检测细胞增殖,CFDA-SE 可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,该荧光信号可在 488 nm 的激发光下进行检测,并可通过流式细胞仪进行分析。

生物活性:CFDA-SE是一种能穿透细胞膜的荧光染料,能与细胞内部的细胞骨架蛋白中的游离胺基发生反应,最终形成具有荧光的蛋白复合物。CFDA-SE进入细胞后,位于细胞膜、细胞质和细胞核中,其中细胞核中的荧光染色最强[1]。CFDA-SE染料能被细胞分裂增殖的细胞均匀遗传,其衰减与细胞分裂的次数成正比。这种现象可以在488nm激发光下用流式细胞仪检测分析,并可用于检测细胞的增殖情况[1]。

体外:CFDA-SE 工作液的配制1.1 储备液的配制取 1 mg CFDA-SE 溶于 0.1794 mL DMSO 中,得到 10 mM CFDA-SE。注意:原液建议-20℃ 或 -80℃ 避光保存,避免反复冻融。1.2 CFDA-SE 工作液的配制在无血清细胞培养中稀释原液注意:请根据实际情况调整CFDA-SE 工作液的浓度。细胞染色2.1 悬浮细胞:4℃,1000 g 离心 3-5 分钟,弃上清。PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶解离细胞,制成单细胞悬液。4℃ 1000 g 离心 3-5 分钟,弃上清。PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。2.2 加入 1 mL CFDA-SE 工作液,室温孵育 30 分钟。 4℃,400 g 离心3-4分钟2.4 PBS 洗涤2 次,每次5分钟。2.5 用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,荧光显微镜或流式细胞仪检测。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。 0 --> CFDA-SE 相关抗体:苏丹I抗体(YA905)

细胞实验:将脾细胞(或PBMC)的单细胞悬浮液在37°C下用PBS中的1 µM CFSE染色9分钟,与20 mL 10%FBS RPMI-1640培养基在室温下混合2分钟,离心,洗涤并计数。将2×106个CFSE标记的脾细胞添加到24孔膜培养皿中的切片顶部[2]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

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参考文献:[1]. A Bruce Lyons, et al. Flow cytometric analysis of cell division by dilution of CFSE and related dyes. Curr Protoc Cytom. 2013;Chapter 9:Unit9.11.

[2]. Xiuyun Jiang et al. Long-lived pancreatic ductal adenocarcinoma slice cultures enable precise study of the immune microenvironment. Oncoimmunology. 2017; 6(7): e1333210.

[3]. Banks HT, et al. Quantifying CFSE Label Decay in Flow Cytometry Data. Appl Math Lett. 2013 May 1;26(5):571-577.

[4]. Cui J, et al. Prostaglandin E3 attenuates macrophage-associated inflammation and prostate tumour growth by modulating polarization. J Cell Mol Med. 2021 Jun;25(12):5586-5601.

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