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Sorafenib Tosylate 是一种有效的口服活性 Raf 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

已有 215 次阅读 2024-9-29 10:27 |系统分类:科研笔记

中文名：甲苯磺酸索拉非尼

CAS：475207-59-1

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture

生物活性：Sorafenib Tosylate (Bay 43-9006 Tosylate) 是一种有效的口服活性 Raf 抑制剂，IC₅₀ 分别为 6 nM 和 20 nM，< b>Raf-1 和 B-Raf。 SorafenibTosylate 是一种多激酶抑制剂，对VEGFR2、的 IC₅₀ 分别为 90 nM、15 nM、20 nM、57 nM 和 58 nM >VEGFR3、PDGFRβ、FLT3 和 c-Kit。 Sorafenib Tosylate 诱导自噬和细胞凋亡。 Sorafenib Tosylate 具有抗肿瘤活性。 Sorafenib Tosylate 是一种铁死亡激活剂^[1]。 IC50 和目标：IC50：6 nM (Raf-1)、20 nM (VEGFR-3)、22 nM (BRAF)、57 nM (PDGFR-β)、58 nM (Flt3)、68 nM (c-KIT)、 90 nM (VEGFR-2)^[1]

体外：Sorafenib Tosylate 还抑制 BRAF^wt (IC₅₀=22 nM)，BRAF^V599E (IC₅₀=38 nM ), VEGFR-2 (IC₅₀=90 nM), VEGFR-3 (IC₅₀=20 nM), PDGFR-β (IC₅₀ >=57 nM)、c-KIT (IC₅₀=68 nM) 和 Flt3 (IC₅₀=58 nM) 在生化分析中^{[1]< /sup>。当 10-0505 细胞与抗人抗 HGF 抗体共同处理时，索拉非尼诱导的 c-Met、p70S6K 和 4EBP1 磷酸化显着降低，表明甲苯磺酸索拉非尼治疗导致 HGF 分泌增加和 c-Met 激活和 mTOR 目标^[2]。}

体内：Sorafenib Tosylate（10、30、50 和 100 mg/kg，口服）治疗以剂量依赖性方式抑制 06-0606 和 10-0505 异种移植物的肿瘤生长（P<0.01）。索拉非尼也显着降低了 06-0606 和 10-0505 异种移植物的生长速度。用索拉非尼 50 mg/kg 和 100 mg/kg 处理的小鼠中 06-0606 肿瘤的重量分别约为对照组的 13% 和 5%。 50 mg 剂量的 Sorafenib 显着抑制小鼠肿瘤生长，细胞系为 5-1318、26-1004 和 10-0505 (P<0.01)。对于 50 mg 剂量，T/C 比率，其中 T 和 C 分别是治疗结束时索拉非尼和载体治疗的肿瘤的中值重量（mg），分别为 06-0606、26-1004、5- 1318 和 10-0505 异种移植物分别为 0.13、0.10、0.12 和 0.49^[2]。二乙基亚硝胺 (DENA) 组的存活率为 73.3%，索拉非尼组为 83.3%，而正常对照组为 100%。与正常对照组相比，DENA 组肝脏指数显着增加（增加 1.51 倍，p<0.05），而与 DENA 组相比，索拉非尼治疗显示肝脏指数显着降低（p<0.05）。索拉非尼组肝脏指数显着降低至低于正常对照组^[3]。

激酶试验：为了测试化合物对各种 RAF 激酶亚型的抑制作用，将索拉非尼添加到 Raf-1 (80 ng)、wt BRAF 或 V599E BRAF (80 ng) 与 MEK-1 (1 μg) 的测定缓冲液 [20 mM Tris] 的混合物中。 (pH 8.2)、100 mM NaCl、5 mM MgCl2 和 0.15% β-巯基乙醇]，终浓度为 1% DMSO。通过添加 25 μL 10 μM γ-[33P]ATP (400 Ci/mol) 启动 RAF 激酶测定（最终体积 50 μL），并在 32°C 下孵育 25 分钟。通过过滤到磷酸纤维素垫上收获磷酸化的 MEK-1，并使用 1% 磷酸洗去未结合的放射性。通过微波加热干燥后，使用 β 板计数器来量化过滤器结合的放射性[1]。

细胞试验：将10-0505、06-0606和26-1004肿瘤切碎并用改良Eagle培养基(MEM)洗涤3次。 800×g 离心 10 分钟收获细胞。在存在或不存在 5 μg/mL 抗人肝细胞生长因子 (HGF) 抗体的情况下，用 3 或 6 μM 索拉非尼的无血清 MEM 处理细胞 48 小时。使用 VIVASPIN 20 收集并浓缩来自载体或索拉非尼处理（不含抗人抗体）的总共 2 mL 条件培养基，并通过蛋白质印迹法测定条件培养基中分泌的 HGF [2]。

动物体内实验:小鼠[2] 对于剂量反应实验，携带06-0606和10-0505异种移植物的小鼠口服四剂索拉非尼（每天10、30、50和100 mg/kg），持续12天。每个治疗组由五只小鼠组成。为了研究索拉非尼的抗肿瘤作用，荷瘤小鼠每天口服 50 mg/kg 索拉非尼，持续 12 天。每个治疗组由 14 只动物组成，每个实验至少重复两次。治疗在肿瘤植入后第7天开始。此时，HCC 异种移植物的大小达到约 100 mm3。为了研究雷帕霉素加索拉非尼对 10-0505 异种移植物生长的影响，给荷瘤小鼠（每组 14 只）口服 200 μL 载体，或 50 mg/kg 索拉非尼，或 1 mg/kg 雷帕霉素，或每日雷帕霉素加索拉非尼，持续指定天数。通过游标卡尺测量肿瘤的长度和宽度，每周至少监测肿瘤生长两次。肿瘤体积计算如下：[长度×宽度2×π/6]。研究结束时，处死小鼠，记录体重和肿瘤重量，并收获肿瘤进行分析。大鼠[3]在该研究中，使用100至120克的雄性白化大鼠。适应期后，对大鼠进行称重并随机分为三组：第1组（正常对照组；n=10）每天给予载体，持续8周。第2组（DENA组；n=15）接受腹膜内单剂量200mg/kg DENA。第3组（索拉非尼组；n=12）在DENA腹膜内注射后6周以每日10mg/kg的剂量口服索拉非尼，持续2周。实验结束时（8周），对大鼠进行称重，用乙醚麻醉，处死，并解剖其肝脏。将新鲜肝脏用冰冷的盐水洗涤两次，在干净的纸巾上擦干，并称重。肝脏指数计算为肝脏重量(g)/最终体重(g)×100。将肝脏分为五部分：一部分保存在10%福尔马林中用于组织病理学检查，另一部分立即冷冻在液氮中并保存在-80°C。

研究领域：MAPK/ERK Pathway | Protein Tyrosine Kinase/RTK | Autophagy | Apoptosis

参考文献：[1]. Wilhelm SM, et al. BAY 43-9006 exhibits broad spectrum oral antitumor activity and targets the RAF/MEK/ERK pathway and receptor tyrosine kinases involved in tumor progression and angiogenesis. Cancer Res. 2004 Oct 1;64(19):7099-109.

[2]. Huynh H, et al. Sorafenib and rapamycin induce growth suppression in mouse models of hepatocellular carcinoma. J Cell Mol Med. 2009 Aug;13(8B):2673-83.

[3]. El-Ashmawy NE, et al. Sorafenib effect on liver neoplastic changes in rats: more than a kinase inhibitor. Clin Exp Med. 2016 Apr 16.

[4]. Zhu W, et al. Combination of sorafenib and Valproic acid synergistically induces cell apoptosis and inhibits hepatocellular carcinoma growth via down-regulating Notch3 and pAkt. Am J Cancer Res. 2017 Dec 1;7(12):2503-2514.