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Veliparib (ABT-888) 是一种有效的 PARP 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

已有 163 次阅读 2024-9-29 10:04 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：Veliparib

中文名：维利帕尼

CAS：912444-00-9

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Veliparib (ABT-888) 是一种有效的 PARP 抑制剂，通过 K_i 抑制 PARP1 和 PARP2 分别为 5.2 和 2.9 nM^[1]。 IC50 和目标：Ki：5.2 nM (PARP1)，2.9 nM (PARP2)^[1]

体外：Veliparib (ABT-888) 还针对 SIRT2 进行了测试，SIRT2 是一种也使用 NAD⁺ 进行催化的酶，发现它没有活性 (>5,000 nM)。 Veliparib 的受体概况在一组 74 种受体结合试验中确定，浓度为 10 μM。 Veliparib 在人 H₁(61%)、人 5-HT_1A (91%) 和人 5 中以 50% 或更高的比例取代对照特异性结合-仅 HT₇ (84%) 站点。这三种受体的 IC₅₀ 分别为 5.3、1.5 和 1.2 μM^[1]。当用 60 μM Veliparib (ABT-888) 处理时，c-Met 敲低细胞显示 4.2-（shMet-A；95% CI=4-4.5）或 4.6 倍（shMet-B；95% CI=4.4-4.8）生长抑制).当用 38 μM Veliparib 处理时，c-Met 敲低细胞表现出 2-（shMet-A；95% CI=1.5-2.5）或 1.9 倍（shMet-B；95% CI=1.3-2.5）生长抑制^[2].在 HaCaT 细胞中，在 Veliparib (ABT-888) 处理后 6 小时，细胞活力在 1,000 µM 硫芥 (SM) 暴露下显着增加，而 Veliparib 在 100 µM SM 暴露下不保护细胞活力。此外，添加 Veliparib 不再显示 SM 暴露后 24 小时的保护作用^[3]。

体内：Veliparib (ABT-888) 是一种有效的 PARP 抑制剂，具有良好的口服生物利用度，可在同源和异种移植肿瘤模型中穿过血脑屏障^[1]。在 MDA-MB-231 异种移植肿瘤模型中，与任一抑制剂单独使用相比，联合治疗（AG014699/PF-02341066 和 Veliparib (ABT-888)/Foretinib）显着减少了肿瘤生长^[2]。

激酶试验：PARP1 酶活性使用商业测定试剂盒进行测量，但使用含有野生型 PARP1 或 PARP Y907 突变体的细胞裂解物代替试剂盒中包含的 PARP1 蛋白。将总裂解物 (500 ng) 添加到每个反应中。 PARP 抑制剂 Veliparib (ABT-888) 的剂量过程为 0.01 至 1,000 μM。野生型和突变体的 PARP 酶活性在与底物孵育后使用读板器测量[2]来确定。

细胞试验：使用 Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 对细胞活力进行定量。该测定基于 Dojindo 的高水溶性四唑盐。 WST-8 被细胞中的脱氢酶还原，生成橙色的水溶性甲臜染料。细胞内脱氢酶产生的甲臜染料的量与活细胞的数量成正比。简而言之，将指数生长的 HaCaT 细胞以 10,000 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板中。暴露于硫芥 (SM) 并施用 Veliparib 后 6 小时或 24 小时，添加 CCK-8 试剂[3。

动物体内实验:小鼠[2] 将MDA-MB-231（0.5×106）、HCC1937（2×106）或MCF-7（5×106）细胞注射到6只雌性裸鼠（Swiss Nu/Nu）的乳腺脂肪垫中-8周龄。将 A1034 (0.5×106) 细胞注射到 6-8 周龄雌性 FVB/NJ 小鼠的乳腺脂肪垫中。将 H1993 (0.5×106) 细胞皮下注射到 6-8 周龄雌性裸鼠 (Swiss Nu/Nu) 的右侧。当肿瘤体积达到50 mm3时，将PF-02341066（5 mg/kg）和Foretinib（5 mg/kg）、AG014699（5 mg/kg）和Veliparib（25 mg/kg）溶解在50 mM乙酸钠水溶液中， pH 4，每周对小鼠施用五次，作为单一药剂或组合药剂，持续图例中指定的天数。在指定时间点测量肿瘤，并通过公式计算肿瘤体积：π/6×长×宽2。对于 MDA-MB-231 和 A1034 异种移植小鼠模型，使用 IVIS 成像系统在治疗前后对小鼠进行成像以评估肿瘤生长。向小鼠注射 100 μL D-荧光素（15 mg/mL，溶于 PBS）。

研究领域：Cell Cycle/DNA Damage | Epigenetics | Autophagy

作用靶点：PARP | Autophagy

参考文献：[1]. Donawho CK, et al. ABT-888, an orally active poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor that potentiates DNA-damaging agents in preclinical tumor models. Clin Cancer Res. 2007 May 1;13(9):2728-37.

[2]. Du Y, et al. Blocking c-Met-mediated PARP1 phosphorylation enhances anti-tumor effects of PARP inhibitors. Nat Med. 2016 Feb;22(2):194-201.

[3]. Liu F, et al. Effects of poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) inhibition on sulfur mustard-induced cutaneous injuries in vitro and in vivo. PeerJ. 2016 Apr 4;4:e1890.