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CCCP 是一种氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂 |MedChemExpress (MCE)

已有 356 次阅读 2024-9-18 13:06 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：CCCP

CAS：555-60-2

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：CCCP 是一种氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂。 CCCP 诱导 PINK1 激活，导致 Parkin Ser65 磷酸化^[1]。 IC50 和目标：STING^[1]IFN-β^[1]

体外：CCCP 抑制由各种类型的 STING 通路激活剂诱导的 IFN-β 产生。 CCCP 通过破坏 STING 和 TBK1 的结合来抑制 STING、TBK1 和 IRF3 的磷酸化。 CCCP 抑制 STING 及其下游信号分子 TBK1 和 IRF3 的激活，但不抑制 STING 向核周区域的易位。 CCCP 会损害 STING 和 TBK1 之间的相互作用，并同时触发线粒体裂变。重要的是，关键的线粒体裂变调节因子 Drp1 的敲除恢复了 STING 活性，表明 CCCP 通过 DRP1 介导的线粒体断裂下调 STING 通路。破坏膜电位的质子载体 CCCP 会抑制 DMXAA 触发的 STING 信号通路。 CCCP 显着抑制 DMXAA 处理的 RAW264.7 细胞和 MEF 中 IFN-β 的产生^[1]。

体内：使用 CCCP 和 PPEF 各 3 mg/kg.bw 的相同剂量。在这两种情况下，细菌载量均观察到 1 个对数减少。然而，当 3 mg/kg.bw 的 PPEF 与 3 mg/kg.bw 的 CCCP 结合使用时，观察到细菌数量减少了 6 log₁₀。开发的模型验证了联合疗法增强的抗菌活性^[2].^99mSD 大鼠心脏中的 Tc-MIBI 信号给予 CCCP（4 mg/kg 腹膜内注射）或车辆也被测量。 ^99mTc-MIBI 信号在给予 CCCP 的大鼠心脏中降低，同时通过 ³¹P 磁共振波谱测量的 ATP 含量降低。为了研究 CCCP 是否降低了大鼠的 ^99mTc-MIBI 信号，我们分析了从给予 CCCP 的大鼠离体心脏组织中的放射性同位素活性。 ^99mTc-MIBI注射后180分钟，CCCP组心脏^99mTc-MIBI信号明显低于载体组^{[ 3]}。

细胞试验：MEF (5×105)、Raw264.7 细胞 (1×106) 和稳定表达 STING 的 HeLa 细胞 (1.5×105) 用 DMXAA (100 μg/mL) 刺激 2 或 3 小时，或用 c-di 转染-GMP (5 μM)、cGAMP (5 μg/mL) 或聚 (dA:dT) (2 μg/mL) 6 小时。 CCCP (50 μM) 与 DMXAA (100 μg/mL) 共同处理，或者在使用 c-di-GMP 或聚 (dA:dT) 处理的情况下处理最后 5 小时[1]。

动物体内实验:小鼠[2]雌性Balb/c小鼠n=6，每个给药组重20-25g，在前4天和1天腹膜内注射2次环磷酰胺150 mg/kg.bw和100 mg/kg.bw，使中性粒细胞减少到细菌感染。将 0.1 mL 106 CFU/mL 细菌悬浮液注射到右后大腿肌肉中。感染后2小时后，用PPEF (3 mg/kg.bw)、CCCP (3 mg/kg.bw)和组合PPEF+CCCP (3 mg/kg.bw+3 mg/kg.bw)处理小鼠溶解于0.1mL无菌水中，单次静脉推注。给予抗菌剂二十四小时后，将小鼠人道处死。无菌收集每只小鼠的右大腿肌肉，均质化并连续稀释和处理以进行定量培养。大鼠[3] 将大鼠随机分为三组。一组在注射 12.5 MBq (337.8 μCi) 99mTc-MIBI 剂量 15 分钟后实施安乐死 (n=6)。其他两组在注射相同剂量的 99mTc-MIBI 后 90 分钟通过腹膜内 (ip) 注射给予 4 mg/kg CCCP（CCCP 组；n=7）或媒介物（媒介物组；n=7），并在注射后安乐死。额外 90 分钟（99mTc-MIBI 注射后 180 分钟）。切除心脏并称重，并使用自动井伽马计数器测量 110 至 170 keV 之间的放射性。 99mTc-MIBI 信号针对物理衰减进行校正（半衰期 = 6 小时）。

研究领域：Immunology/Inflammation | Metabolic Enzyme/Protease | Anti-infection | Apoptosis

参考文献：[1]. Kwon D, et al. Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone (CCCP) suppresses STING-mediated DNA sensing pathway through inducing mitochondrial fission. Biochem Biophys Res Commun. 2017 Aug 30. pii: S0006-291X(17)31704-7.

[2]. Sinha D, et al. Synergistic efficacy of Bisbenzimidazole and Carbonyl Cyanide 3-Chlorophenylhydrazonecombination against MDR bacterial strains. Sci Rep. 2017 Mar 17;7:44419.

[3]. Kawamoto A, et al. Measurement of technetium-99m sestamibi signals in rats administered a mitochondrial uncoupler and in a rat model of heart failure. PLoS One. 2015 Jan 16;10(1):e0117091.

[4]. Kondapalli C, et al. PINK1 is activated by mitochondrial membrane potential depolarization and stimulates Parkin E3 ligase activity by phosphorylating Serine 65. Open Biol. 2012 May;2(5):120080.

[5]. Haifeng Jiao, et al. Mitocytosis, a migrasome-mediated mitochondrial quality-control process. Cell. 2021 May 27;184(11):2896-2910.e13.