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Everolimus (RAD001) 是一种Rapamycin (HY-10219) 衍生物 |MCE

已有 1454 次阅读 2024-9-13 17:41 |系统分类:科研笔记

MCE 国际站：Everolimus

中文名：依维莫司

CAS：159351-69-6

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Everolimus (RAD001) 是一种Rapamycin (HY-10219) 衍生物，是一种强效、选择性和口服活性mTOR1 抑制剂。 Everolimus 与 FKBP-12 结合以产生免疫抑制复合物。 Everolimus 抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬。 Everolimus 具有强效的免疫抑制和抗癌活性^[1]^[2]。 IC50 和目标：IC50：5 至 6 nM (mTOR)^[1]

体外：依维莫司 (RAD001) 是一种具有口服活性的雷帕霉素衍生物，可抑制 Ser/Thr 激酶 mTOR^[1]。在敏感的小鼠 B16/BL6 黑色素瘤 (IC₅₀, 0.7 nM) 和不敏感的人宫颈 KB-31 (IC₅₀, 1,778 nM) 中，依维莫司的抗增殖浓度导致 S6K1 和底物 S6 的完全去磷酸化以及 4E-BP1 迁移率的变化，这表明磷酸化状态降低^[3]。依维莫司对来自 BT474 细胞系和原发性乳腺癌细胞的总细胞和干细胞均表现出剂量依赖性抑制作用，尽管具有不同程度的生长抑制作用。与总细胞相比，依维莫司在所有测试浓度下对干细胞生长的抑制作用均较差（P<0.001）。 Everolimus 对 BT474 和主要 CSC 的 IC₅₀ 值分别为 2,054 和 3,227 nM，比其相应总细胞的 IC₅₀ 值高 29 倍和 21 倍，分别^[4]。

体内：依维莫司在小鼠和大鼠中均具有口服活性，产生抗肿瘤作用，其特征是显着降低肿瘤生长速率，而不是产生肿瘤消退。在大鼠 CA20498 模型中，每天用依维莫司（0.5 或 2.5 mg/kg）治疗会剂量依赖性地抑制生长，使用较高剂量 5 mg/kg 的间歇给药（每周一次或两次）也显示出相似的抗肿瘤功效。依维莫司的抑制作用以持续抑制而非消退为特征，并且与任何体重减轻均无关^[1]。依维莫司治疗 (0.1-10 mg/kg/d) 的作用是选择性的，不同于 PTK/ZK (100 mg/kg) 的作用。使用任何一种生长因子，依维莫司剂量依赖性地增加血红蛋白含量（转化为血液当量并指示血管数量和血管渗漏）但降低 Tie-2 含量（指示血管数量的内皮细胞数量）这对 VEGF 刺激有重要意义，但对 bFGF 刺激没有意义。依维莫司在小鼠体内的药代动力学表明，单次给药后在人肿瘤异种移植物中达到的最大水平仅为 0.1 μM，而血浆水平达到 1 至 3 μM 约 4 小时^[3]。

细胞试验：将肿瘤细胞以 500 至 5,000/100 μL/孔的密度接种到 96 孔板中，并以最佳细胞数（通常每孔 1,000 至 2,000 个）进行重复实验，并孵育过夜。将细胞暴露于依维莫司并孵育4天，并通过亚甲蓝染色测定细胞数量。为此，将 50 μL 戊二醛 [20% (v/v)] 添加到孔中，在室温下孵育 10 分钟。吸出培养基，用蒸馏水洗涤细胞，加入 100 μL 亚甲蓝 [0.05% (w/v) 水溶液] 并在 37°C 下孵育 10 分钟。染色细胞用水洗涤 3 次，加入 200 μL HCl [3% (v/v)]，室温振荡 20 分钟。每个孔的吸光度在 650 nm 处测定。 IC50 值使用 Softmax 2.0 软件计算[2]。

动物体内实验:每天在给动物给药之前制备小鼠[2]依维莫司、PTK/ZK和它们各自的载体，并根据动物体重单独调整给药体积。在 C57/BL6 小鼠中，依维莫司的口服剂量范围为 0.1 至 10 mg/kg/d (10 mL/kg)，主要剂量为 2.5 至 10 mg/kg，因为这些剂量可提供最大效果。 PTK/ZK 以 50 至 100 mg/kg/d 口服给药。大鼠 [2] Wistar-Furth 大鼠根据体重分为两个相等的组，并用载体或依维莫司（10 mg/kg/d 口服，小鼠每周口服 5 mg/kg 3 次）。在基线（第 0 天）第一次测量后，立即通过强饲法（10 mL/kg）口服依维莫司或载体，最多持续 7 天，随后在最后一次给药后 30 分钟内进行磁共振测量。

研究领域：PI3K/Akt/mTOR | Autophagy | Apoptosis | Immunology/Inflammation | Anti-infection

作用靶点：mTOR | FKBP | Autophagy | Apoptosis | Bacterial

参考文献：[1]. O'Reilly T, et al. Biomarker Development for the Clinical Activity of the mTOR Inhibitor Everolimus (RAD001): Processes,Limitations, and Further Proposals. Transl Oncol. 2010 Apr;3(2):65-79.

[2]. Lane HA, et al. mTOR inhibitor RAD001 (everolimus) has antiangiogenic/vascular properties distinct from a VEGFR tyrosine kinase inhibitor. Clin Cancer Res, 2009, 15(5), 1612-1622.

[3]. Zhu Y, et al. Antitumor effect of the mTOR inhibitor Everolimus on human breast cancer stem cells in vitro and in vivo. Tumour Biol. 2012 Oct;33(5):1349-62.

[4]. Kawata T, et al. Dual inhibition of the mTORC1 and mTORC2 signaling pathways is a promising therapeutic target for adult T-cell leukemia. Cancer Sci. 2018 Jan;109(1):103-111.