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KB-R7943 mesylate 是一种广泛使用的反向 Na+/Ca2+ 交换剂 |MCE

已有 191 次阅读 2024-9-6 15:25 |系统分类:科研笔记

中文名：

CAS：182004-65-5

品牌：MedChemExpress (MCE)

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生物活性：KB-R7943 mesylate 是一种广泛使用的反向 Na⁺/Ca²⁺ 交换剂 (NCX_rev ) 的 IC₅₀ 为 5.7±2.1 μM。 KB-R7943 mesylate 通过激活 JNK 通路和阻断自噬通量诱导癌细胞死亡。 IC50 和目标：IC50：5.7±2.1 μM（Na⁺/Ca²⁺ 交换剂）^[1]

体外：KB-R7943 甲磺酸盐阻断 NMDAR 介导的离子电流，并抑制 NMDA 诱导的细胞溶质 Ca²⁺ 增加，IC₅₀=13.4±3.6 µM，但加速钙失调和线粒体谷氨酸处理的神经元去极化。 KB-R7943 以不依赖 Ca²⁺ 的方式去极化线粒体。 KB-R7943 抑制 2,4-二硝基苯酚刺激的培养神经元呼吸，IC₅₀=11.4±2.4 µM。除了 NCX_rev 之外，KB-R7943 还以剂量依赖性和可逆性阻断 NMDA 引发的离子电流。 KB-R7943 剂量依赖性地抑制 NMDA 诱导的 [Ca²⁺]_c 增加，IC₅₀=13.4±3.6 µM 证实了抑制作用电生理实验中观察到的 NMDA 受体^[1]. _wt用溶解在大量灌注中的 KB-R7943（10 μM，10 分钟）预处理的 RyR1-HEK 293 表现出对咖啡因的显着减弱反应。在这方面，与 0.5 和 0.75 mM 相比，KB-R7943 对咖啡因诱导的 Ca²⁺ 释放产生更明显的抑制（分别为 60 对 58 对 37%，p<0.05） ^[2]。 KB-R7943 在膜去极化过程中快速抑制 I_hERG 和天然 I_Kr，IC₅₀ 值分别为 ~89 和 ~120 nM，在去极化电压命令为 +20 mV 后，电流尾部为 −40 mV。 KB-R7943 对 I_hERG 的抑制作用表现出时间依赖性和电压依赖性，但与激活的通道相比，未激活的通道没有偏好^[3]。

细胞试验：将稳定表达 wtRyR1 (wtRyR1-HEK 293) 的 EK 293 细胞维持在补充有 2 mM 谷氨酰胺、100 μg/mL 链霉素、100 U/mL 青霉素、1 mM 丙酮酸钠和 10% 胎牛血清的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基中。 37°C，5% CO2。 wtRyR1-HEK 293 细胞在 37°C 下加载 5 μM Fluo-4 乙酰氧基甲酯 30 分钟，以测量由 140 mM NaCl、5 mM KCl、2 mM MgCl2、2 mM CaCl2、10 mM 组成的成像缓冲液中的 Ca2+ 瞬变HEPES 和 10 mM 葡萄糖，pH 7.4，补充有 0.05% 牛血清白蛋白。将细胞用成像缓冲液洗涤 3 次，并另外在室温下孵育 20 分钟。用成像缓冲液将负载染料的细胞洗涤 3 次，并使用连接到 IX-71 显微镜的电荷耦合器件相机（带有 40 倍物镜）进行成像。使用 EasyRatioPro 捕获和监控图像序列。使用 AutoMate Scientific 将溶解在成像缓冲液中的咖啡因集中应用 15 秒。将 KB-R7943 溶解在成像缓冲液中，并在应用咖啡因之前将 wtRyR1-HEK 293 细胞孵育 10 分钟[2]。

研究领域：Membrane Transporter/Ion Channel | Autophagy

作用靶点：Na+/Ca2+ Exchanger | Autophagy

参考文献：[1]. Cheng H, et al. High potency inhibition of hERG potassium channels by the sodium-calcium exchange inhibitor KB-R7943. Br J Pharmacol. 2012 Apr;165(7):2260-73.

[2]. Barrientos G, et al. The Na+/Ca2+ exchange inhibitor 2-(2-(4-(4-nitrobenzyloxy)phenyl)ethyl)isothiourea methanesulfonate(KB-R7943) also blocks ryanodine receptors type 1 (RyR1) and type 2 (RyR2) channels. Mol Pharmacol. 2009 Sep;76(3):560-8.

[3]. Brustovetsky T, et al. KB-R7943, an inhibitor of the reverse Na+ /Ca2+ exchanger, blocks N-methyl-D-aspartate receptor and inhibits mitochondrial complex I. Br J Pharmacol. 2011 Jan;162(1):255-70.

[4]. Long Z, et al. The reverse-mode NCX1 activity inhibitor KB-R7943 promotes prostate cancer cell death by activating the JNK pathway and blocking autophagic flux. Oncotarget. 2016;7(27):42059-70.