1) 将细胞铺在 24 孔黑孔板上，铺板密度为 0.5-2.0×10⁵ 个细胞/孔，37℃，培养过夜。

2) 用超纯水配制 15 mg/mL 的 D-萤光素储存液 (100×)。

注：D-萤光素溶液最好现用现配，也可分装后-20℃ 避光冻存，有效期 1 个月。

3) 用预热好的细胞培养基 1: 100 稀释储存液，配制终浓度 150 μg/mL 的 D-萤光素工作液 (1×)。

4) 去除培养细胞的培养基直至无残留。

5) 向细胞内添加 1×D-萤光素工作液后，立即进行图像分析。

2) 按 150 mg/kg 剂量和 10 μL/g 注射体积向每支小鼠注射相应量的 15 mg/mL D-萤光素溶液。