广谱丽沙病毒疫苗的研制（最新进展）(2)

Toward the Development of a Pan-Lyssavirus Vaccine

前记 

    目前丽沙病毒属的病毒，即（经典）狂犬病毒和狂犬病毒相关病毒，总共发现有大约18种，可细分为三个系统群（phylogroups）。现有狂犬病毒疫苗是用（经典）狂犬病毒（RABV）制备的，只能针对系统群１的病毒提供较好的免疫保护作用，而对系统群2和3的病毒则效果可能不佳。为了确保人类完全免除所有类型狂犬病毒的危害，有必要开发广谱狂犬病疫苗，能针对各种类型的狂犬病毒都发挥免疫保护作用。由于基因１型狂犬病毒（RABV）以外的17种丽沙病毒绝大多数都以蝙蝠为宿主，目前已知它们对人的危害很罕见，所以长期以来对此类疫苗研发的需求和动力不足，因而经费来源有限，进展缓慢。美国宾州费城的杰弗逊大学和美国ＣＤＣ的研究人员曾合作在广谱狂犬病毒疫苗研究方面取得重要进展，他们的研究论文于2020年7月21日发表在《Cell Reports （细胞报告）》杂志上，本博客当年曾作过介绍（见相关博文）。

美国费城杰弗逊大学的研究人员在本月10日的《Viruses（病毒）》杂志上又发表论文介绍他们在此项研究中的最新进展。现将这篇新论文的主要内容进行摘译（因内容较多，分数次发布）。 

4. 讨论（1）

结构生物学及其相关工具的迅速发展，包括计算生物学、X射线晶体学和单克隆抗体图谱（mapping），已经解析了许多病毒的糖蛋白结构，导致了疫苗开发方法的革命[37]。在本文中，我们提出了一种针对狂犬病毒的下一代疫苗。特别关注狂犬病毒的AS1和莫科拉病毒糖蛋白，以设计和开发嵌合RABV-cAS1疫苗。RABV-cAS1针对系统群I和II狂犬病毒的多种病毒株具有保护作用，同时不会影响对RABV的免疫原性和保护能力。

我们证明，作为一个线性抗原位点[19,21]，AS 1(222至252位)是两种不同丽沙病毒(RABV和MOKV)之间替代的功能选择，同时保持重组病毒稳定的复制。先前的研究也试图使用不同的方法开发广谱丽沙病毒疫苗，例如利用活载体表达丽沙病毒糖蛋白，利用多种疫苗结构，以及利用重组狂犬病毒表达丽沙病毒糖蛋白或单一嵌合糖蛋白[29,38]。使用重组狂犬病毒和重组痘苗病毒表达狂犬病毒糖蛋白的活载体策略可能因安全性问题而难以获准用于人体 [38, 39]。 建议使用多种疫苗构建体，但这种策略对于低收入和中等收入国家来说成本较高 [40, 41]。 最近，一种编码两种G蛋白（RABV G和MOKV G）的重组狂犬病毒导致病毒生长速度降低，并观察到G蛋白的不稳定性 [29]。因此，研究人员基于一种相关的弹状病毒（Rhabdovirus）—口蹄疫病毒在融合前和融合后的结构，创建了一种由MOKV G和RABV G组成的单个嵌合体G [42]。其中，携带嵌合体G的RABV之一（LyssaVax）表现稳定，而另一株则表现出低效的病毒传播和低感染性病毒滴度 [29]。

Fisher等人通过鼻内攻击测试了LyssaVax针对rRABV和rMOKV两种活病毒的保护能力。虽然这种途径是人工的，与自然的狂犬病感染途径不同，但它们对rRABV和rMOKV具有良好的保护作用[29]。同一组研究了LyssaVax对来自系统群I和II的一组LyssaVax病毒产生的血清学模式，但不包括系统群III。虽然LyssaVax可以刺激VNA（病毒中和抗体）滴度来对抗系统群II病毒，但研究表明，它在刺激VNA对抗系统群I中的非RABV病毒，尤其是IRKV和Duvenhage病毒（DUVV)的能力有所下降[29]。Fisher等人的研究确实表明，他们用于开发疫苗的“结构域（domain）”策略减少了一些针对系统群I中不同的丽沙病毒的VNAs的损失。通过在RABV- G载体疫苗中插入一个单一抗原侧面(MOKVG AS1)，我们假设在保持对RABV的免疫原性的同时，扩展了对MOKV的免疫原性。本研究显示对MOKVG和RABVG均有较高的IgG滴度。同时，ELISA法对狂犬病免疫小鼠血清观察到异种抗原之间存在交叉反应，与既往研究所显示的相同[29];这些抗体并未介导VNAs（病毒中和抗体）。

我们还假设，与标准疫苗相比，嵌合抗原位点(222-252位)可以提供更广谱的保护，抵御各种丽沙病毒的攻击，同时仍然保持类似的针对经典狂犬病的保护。RABV-cAS1显示了MOKV的AS1在维持针对系统群I的VNA的同时引发针对系统群II病毒的中和抗体的潜力。

这些结果与其他研究一致，这些研究表明每个抗原位点在产生中和抗体时具有特异性。我们的研究结果证实了基于AS1的疫苗方法能够产生持续的免疫应答和特异性中和抗体[43-45]。

（未完待续）

参考文献：

Ben Hamed, S.; Myers, J.F.; Chandwani, A.; Wirblich, C.; Kurup, D.; Paran, N.; Schnell, M.J. Toward the Development of a Pan-Lyssavirus Vaccine. Viruses 2024, 16, 1107.  https://doi.org/10.3390/v16071107 

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