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如何配置CHES-NaOH缓冲溶液？
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最近在课题研究的过程中，需要寻找一种pH在9.0左右的生物用缓冲体系。一开始在维基百科等网页寻找的时候，一般只有6.0-8.0范围之内的常用缓冲体系。随着搜索的进行，相关的资料也越来越多。第一个合适的缓冲体系来自文献：Angew. Chem. Int. Edit. 2008, 47, (46), 8831-8834。其中提到了两个生物用缓冲体系，一个是pH在9.0的CHES(N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid)，第二种是pH在10.0的CAPS (N-cyclohexyl-3-aminopropanesulfonic acid)。于是继续在网上寻找CHES的相关信息。比较好的信息来自于Sigma公司的网页，是关于缓冲液配置的Buffer Reference Center。这样基本可以确定在我们的课题中使用CHES缓冲体系。
https://blog.sciencenet.cn/blog-339334-623192.html
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CHES的结构为：
在25℃时候的pKa值为9.3左右，接近我们需要的9.0。
剩下的问题是如何具体配置成需要的缓冲溶液，我们的目标是50 mL, pH 9.0, 0.1 M的CHES缓冲液母液。开始的时候认为和Tris-HCl缓冲体系差不多，于是根据Henderson-Hasselbalch公式计算了各自的加入量。在准备称量的时候又想到一个问题，CHES在水中的溶解性怎么样？或者CHES在水中的饱和浓度是多少？在网上查到信息为：15 g CHES可以溶在85 mL的水中，为无色溶液。那么，0.1 M的浓度是可行的。就在搜索的过程中，偶然发现一个CHES配置配方(打开网页后单击“相关资料”选项卡)，而其中是使用NaOH来调节pH值。再看一下CHES的结构，在水中应该是呈酸性的，后面才用NaOH来调节pH至8.6-10。
于是立马改变配置方法：配置过程如下：（1）称取CHES 1.036 g (MW=207.3 g/mol) ，加入40 mL纯水；（2）测40 mL CHES水溶液的pH值为4.50，测试温度为27℃；（3）加入1 mL 1 M NaOH溶液后，测试pH值为8.83；（3）加纯水定容至50 mL，转移到50 mL样品瓶中，室温下保存。
这样，我们需要的pH在9.0左右的生物用缓冲溶液母液就配置好了，根据经验，在实验的过程中，最后的pH在8.83左右，但会有一点偏差，接近于9.0，符合实验要求。
配置一种缓冲溶液花费了半天的时间，而且在过程中还差一点犯很严重的错误（用酸还是碱调pH值）。为了在实验过程中得到可靠的数据，实验细节很重要，而实验中需要的基础知识还需要认真地对待。
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