<1> 本课题拟阐明*****的代谢途径及其关键酶。
以TCA循环中的重要中间产物****聚合为****，反应步骤有限，转化效率较高，关键酶及其基因确定并不困难。申请人已经得到了产量较高的微生物菌种，并获得到了关键酶的重要信息，本课题的科学创新性不足，建议申报应用为主的课题。
申请人在立项依据中已阐明关建酶应为*****，且其与*****等酶相似，构建全长基因组文库是否是确定相关基因的唯一办法？是否经济？
课题名称包含“机理研究”，然而具体研究内容中对关键酶研究的阐述比较概括和笼统，缺乏深度。
项目组成员无博士后人员，但经费预算中有博士后劳务费用列支。
建议不予资助。

<2> *****是重要的生物化工原料，具有广泛的用途。本项目集中于****聚合形成*****的分子机制解析，在途径预测的基础上拟克隆*****的生物合成基因，通过体内和体外相结合的研究方法阐明其功能和相应的调控机制。
该申请具有较好的应用研究意义。研究内容有较好的针对性，重点较突出。总体方案合理可行。申请者所依托的实验室和单位具有较好的条件和前期工作基础。申请者具有相关的研究背景和积累，相信能够保证课题的顺利开展。

<3> 该项目前期分离到一株可以高产*****的真菌，希望通过本课题解析该菌*****合成的途径和机理，工作具有一定的研究意义。但是课题的研究重点不突出，创新性有待考究，课题按照已发表的文献，推出一条假设的合成途径，并按照这个途径设计实验方案，如果该合成途径正确，只是发现了一条已有途径，工作创新性不足；如果是新的合成途径，按照课题设计的方案将无法进行。另外，本课题的可行性不足，一是CDNA文库的筛选，课题提出利用合成*****的大肠杆菌做为宿主，基因工程改造的宿主转化效率偏低，会造成文库容量不足，同时利用大肠杆菌分泌***做为底物和外源添加底物筛选看不出有什么优势；二是课题想利用CDNA文库筛选*****合成相关的酶，但是利用pUC18做载体，目的基因靠什么启动子表达未说明，另外按照课题所说的筛选方案，含有把*****转化成其它产物的酶的克隆一样不会出现沉淀，会有很多假阳性；三是*****转化系统是否建立，文中只说正在进行中，并未说明如何建立，采用的什么载体系统，让人怀疑是否已建立该菌的转化系统。因此，不予资助。

 

虚心向各位专家请教，是否有必要继续开展工作的必要？