一、产品简介：

土壤过氧化物酶（Solid- Peroxidase，S-POD）主要来源于土壤微生物，能够氧化土壤有机物质产生过氧化物，在腐殖质的形成过程中具有重要作用。

土壤过氧化物酶（S-POD）在过氧化氢存在下催化有机物质氧化成醌，该有色产物在430nm有特征光吸收，通过测定进而计算得出土壤过氧化物酶活性大小。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵、天平、可调式移液器、30-50目筛、乙醚和蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；

2、标准溶液的配制：把0.2mg/mL标准品母液用试剂五稀释成0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625mg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至430nm。

② 标准曲线测定：直接测定稀释后各标准管的吸光度，记为A标准。取200μL试剂五直接测定吸光度，记为A空白。计算ΔA标准=A标准-A空白。

③ 操作表：

4、正式实验：

① 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

② 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μg/mL）。

2、S-POD活力计算：

单位定义：每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位(U)。

S-POD活力(U/g土样)=x×V÷W÷T=14.4×x÷W

V：反应总体积，0.6mL；          T：反应时间，1h=1/24d；

W：土壤样本实际取样量，g；       

注意事项：

乙醚有毒易挥发，操作时注意防护，以免发生危险。