一、产品简介：

生物碱存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物，大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。  生物碱与溴甲酚绿指示剂反应，生成绿色化合物，在 416nm 处有最大吸收峰。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、超声波清洗器、恒温水浴锅/培养箱、研钵、天平、可调式移液器、40-60目筛、三氯甲烷、蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备：

样本烘干粉碎，过 40-60目筛。称取约 0.02g 样本，加入 1mL提取液，充分混匀后，超声提取 60min。8000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。

2、标准溶液的配制：把1mg/mL标准品母液用提取液稀释成0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至416nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将待测样本适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的D和W代入公式计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（mg/mL）。

2、按照样本质量计算：

总生物碱含量(mg/g 质量)=x×V÷W×D=x÷W×D

V：提取液的总体积，1mL；                W：样品质量，g；               

D：稀释倍数，未稀释即为1。