一、产品简介：

木糖是一种戊糖。天然D-木糖是以多糖的形态存在于植物中。木糖可以活化人体肠道内的双岐杆菌并促其生长，双歧杆菌是益菌，该菌越多越有益人体健康，食用木糖能改善人体的微生物环境，提高机体的免疫能力；同时木糖在小肠上段吸收后不参与体内的代谢，经肾脏排出。因此，D-木糖的吸收一直作为小肠吸收不良的重要功能指标。  D-木糖在强酸条件下水解产生糠醛，糠醛可与间苯三酚反应生成粉红色化合物，在554 nm处有特殊吸收峰，据此可由吸光值计算出样本中木糖的含量。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、浓盐酸、冰乙酸、蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

① 组织样本：称取约0.1g样品，加入 1 mL 提取液，研磨匀浆后，在 100℃水浴锅中准确水解 2 h，然后于 10000 rpm，室温离心 15 min，弃沉淀，取上清液待测。【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1：5~10的比例进行提取。

② 血清（浆）等液体样本：直接测定，若浑浊则离心后测定。

2、标准溶液的配制：把10mg/mL标准品母液用蒸馏水稀释成0.8、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min，调节波长至554nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将待测样本用蒸馏水适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的D和W代入公式计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（mg/mL）。

2、按样本质量计算：

D-木糖含量（mg/g 质量）= x×V1÷(W×V1÷V)×D=x÷W×D

3、按液体体积计算：

D-木糖含量（mg/L）= x×V1÷V1×D=x×D

V1：加入样本体积，0.05mL；         V：提取液体积，1mL；       

W：样品质量，g；                   D：稀释倍数，未稀释即为1。