一、产品简介：

鞣花酸又名六羟基联苯二酸二内酯，是一种高附加值的林产精细化工品，广泛存在于植物界，可通过鞣花单宁降解以及由没食子酸或没食子酸酯合成。鞣花酸具有较强的抗脂质过氧化和清除自由基的能力，对多种细菌和病毒有抑制作用，能抑制由化学致癌物诱发的肝、肺、食道及皮肤等部位的癌变。

本试剂盒将鞣花酸溶于适量稀碱配制分析试液的方法，确定鞣花酸试样在253nm有最大吸收峰，且试液浓度与吸光度之间具有良好的线性关系。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板（UV板）、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、30-50目筛、蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

① 组织样本：将样本烘干至恒重，粉碎，过30-50目筛后，称取0.01g，加入200μL试剂一，80℃水浴提取90min，再加入800μL试剂二混匀，12000rpm，25℃离心10min，取上清待测。

2、标准溶液的配制：把100μg/mL标准品母液用蒸馏水稀释成40、20、10、5、2.5、1.25μg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至253nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将待测样本用蒸馏水适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μg/mL）。

2、鞣花酸含量(mg/g 质量)=x×V÷10³÷W×D

V：加入提取液体积，1mL；            10³：μg与mg的转换关系；

W：样品质量，g。                     D：稀释倍数，未稀释即为1。