一、产品简介：

羟自由基是一种氧化能力很强的自由基，可使糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类发生氧化，与许多疾病的产生有关。Fenton反应产生羟自由基与水杨酸发生反应，生成于510nm处有特殊吸收的2.3-二羟基苯甲酸，当加入具有清除羟自由基功能的被测物，就会减少生成的羟自由基，从而使有色化合物生成量减少，在510nm处测量被测物反应液的吸光度，与空白液相比较，以测定被测物对羟自由基的清除能力。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、蒸馏水和冰。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

① 组织样本：称取0.1g样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1：5~10的比例进行提取。

② 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。

③ 提取物（或者药物）可配成一定浓度，如5mg/mL。

2、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至510nm。

② 操作表：

3、正式实验：

① 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

② 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

羟自由基清除率D%=[1-(A测定-A对照)÷A空白]×100%