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文章:Ganoderma lucidum reduces obesity in mice bymodulating the composition of the gut microbiota
杂志:Nature Communication
研究方案:
1)8周龄的小鼠随机分成6组,每组5-7只小鼠;分别是正常饮食(chow)、正常饮食加8%的灵芝水提物(chow+8%WEGL)、高脂饮食(HFD)、高脂饮食加2%的灵芝水提物(HFD+2%WEGL)、高脂饮食加4%的灵芝水提物(HFD+4%WEGL)、高脂饮食加8%的灵芝水提物(HFD+8%WEGL);
2)二代测序的16s测序数据分析肠道菌群,传统的分子生物学方法有PCR、Western blotting、Flow cytometry analysis等;
研究结论:
1)对体重、附睾脂肪、皮下脂肪、肝脏脂肪的影响,灵芝水提物有助于缓解体重的增长(见下图);为了探究缓解体重增长的机制,作者检测了小鼠肠道内的菌群情况。
2)灵芝水提物有助于降低Firmicutes(厚壁菌门)和Bacteroidetes(拟杆菌门)的比值,人和小鼠的早期研究发现厚壁菌门和拟杆菌门的比值在肥胖群体中较高。这也一定程度解释了灵芝水提物为什么能够减缓体重的增加。
3)粪便移植对小鼠体重的影响,作者通过测序的方法研究了粪便移植后小鼠肠道菌群的变化。移植了HFD饮食小鼠的粪便同移植正常小鼠和服用灵芝水提物小鼠的粪便的肠道菌有明显不同。移植了HFD饮食小鼠粪便的小鼠肠道中,Firmicutes/Bacteroidetes的比例和变形菌门(Proteobacteria)及脱铁杆菌门(Deferribacteres)的水平同HFD饮食的小鼠并无明显差别。而移植了正常小鼠粪便和服用灵芝水提物小鼠粪便的HFD小鼠,肠道菌群能够恢复到同在正常饮食和服用灵芝水提物小鼠同样的水平。
4)通过检测mRNA的表达水平(RT-PCR)检测了HFD饮食的小鼠体内TNF-a、IL-1b、IL-6、PAI-1和IL10水平的变化。发现灵芝水提物使用能够降低HFD饮食的小鼠血清中TNF-a、IL-1b、IL-6和PAI-1的含量。随着灵芝水提物剂量的增加,这种效果更加明显。
5)内毒血症和TLR4信号通路能够控制目标组织的促炎细胞因子水平,进而导致HFD饮食的小鼠体内产生慢性炎症和胰岛素耐受性。作者通过Westernblot检测了TLR4信号通路中和内毒血症中的蛋白表达。发现灵芝水提物能够通过减轻内毒血症来降低HFD饮食小鼠的胰岛素耐受性。
6)根据之前的研究报道,HDF饮食小鼠肝脏和脂肪组织中,脂质合成基因表达量比较高。作者的研究发现,在HFD饮食中添加8%的灵芝水提物能够降低这种基因的表达,但是在正常饮食的小鼠中,灵芝水提物的作用并不明显。
7)HFD饮食引起的肠道失调会影响肠壁的渗透性,进而使细菌产生的内毒素进入到体内循环。研究结果显示在,HFD饮食的小鼠中,灵芝水提物可能参与到肠屏障的修复中。
8)根据灵芝水提物中物质分子量的不同,将其分为四组成分G1,G2,G3,G4。其中分子量最大的一组G1,主要是由分子量大于300kDa的多糖以及47.5%的甘露糖,26.3%的葡萄糖和16.9%的半乳糖等单糖组成。实验结果表明,G1单独作用的效果同灵芝水提物作用效果基本接近,推测灵芝水提物中的有效成分主要为一些大分子的糖类。
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GMT+8, 2024-12-23 21:17
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