常规HE染色步骤

（1）二甲苯（Ⅰ）                            5-10 min

(2) 二甲苯（Ⅱ）                           5-10 min

(3) 95%乙醇（Ⅰ）                           1-3 min

（4）95%乙醇（Ⅱ）                            1-3 min

（5）80%乙醇                                  1 min

（6）蒸馏水                                    1 min

（7）苏木精液染色                             5-15 min

(8 ) 流水稍洗去苏木精液                          1-3 s

(9) 1%盐酸乙醇                                 1-3 s

(10) 稍水洗                                   10-30 s

(11)促蓝液返蓝                               10-30 s

(12) 流水冲洗                                10-15 min

（13）蒸馏水过洗                                 1-2 s

(14) 0.5%曙红液染色                           1-3 min

(15) 蒸馏水稍洗                                  1-2 s

(16) 80%乙醇稍洗                                1-2 s

(17) 95%乙醇（Ⅰ）                               2-3 s

(18) 95%乙醇（Ⅱ）                              3-5 s

(19) 无水乙醇                                5-10 min

(20) 石炭酸二甲苯                            5-10 min

(21) 二甲苯（Ⅰ）                                2 min

(22) 二甲苯（Ⅱ）                               2 min

(23) 二甲苯（Ⅲ）                               2 min

(24) 中性树胶封固

注：①第（10）、（11）步可省去，（12）步冲水时间需延长至20-30min。

②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

* 冷冻切片HE染色步骤：

（1）冰冻切片固定                    10～30 s

（2）稍水洗                            1～2 s

（3）苏木精液染色（60℃）              30～60 s

（4）流水洗去苏木精液                  5～10 s

（5）1%盐酸乙醇                        1～3 s

（6）稍水洗                             1～2 s

（7）促蓝液返蓝                       5～10 s

（8）流水冲洗                         15～30 s

（9）0.5%曙红液染色                  30～60 s

（10）蒸馏水稍洗                         1～2 s

（11）80%乙醇                           1～2 s

（12）95%乙醇                          1～2 s

（13）无水乙醇                          1～2 s

（14）石炭酸二甲苯                      2～3 s

（15）二甲苯（Ⅰ）                       2～3 s

（16）二甲苯（Ⅱ）                      2～3 s

（17）中性树胶封固。

   注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

染色结果：细胞核蓝色、胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

4．12 切片脱水透明   切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖，。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石碳酸二甲苯进行脱水。石碳酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。

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