博文
常规HE染色步骤(含冰冻部分)
||
（1）二甲苯（Ⅰ） 5-10 min
(2) 二甲苯（Ⅱ） 5-10 min
(3) 95%乙醇（Ⅰ） 1-3 min
（4）95%乙醇（Ⅱ） 1-3 min
（5）80%乙醇 1 min
（6）蒸馏水 1 min
（7）苏木精液染色 5-15 min
(8 ) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s
(9) 1%盐酸乙醇 1-3 s
(10) 稍水洗 10-30 s
(11)促蓝液返蓝 10-30 s
(12) 流水冲洗 10-15 min
（13）蒸馏水过洗 1-2 s
(14) 0.5%曙红液染色 1-3 min
(15) 蒸馏水稍洗 1-2 s
(16) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(17) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s
(18) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s
(19) 无水乙醇 5-10 min
(20) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(21) 二甲苯（Ⅰ） 2 min
(22) 二甲苯（Ⅱ） 2 min
(23) 二甲苯（Ⅲ） 2 min
(24) 中性树胶封固
注：①第（10）、（11）步可省去，（12）步冲水时间需延长至20-30min。
②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
* 冷冻切片HE染色步骤：
（1）冰冻切片固定 10～30 s
（2）稍水洗 1～2 s
（3）苏木精液染色（60℃） 30～60 s
（4）流水洗去苏木精液 5～10 s
（5）1%盐酸乙醇 1～3 s
（6）稍水洗 1～2 s
（7）促蓝液返蓝 5～10 s
（8）流水冲洗 15～30 s
（9）0.5%曙红液染色 30～60 s
（10）蒸馏水稍洗 1～2 s
（11）80%乙醇 1～2 s
（12）95%乙醇 1～2 s
（13）无水乙醇 1～2 s
（14）石炭酸二甲苯 2～3 s
（15）二甲苯（Ⅰ） 2～3 s
（16）二甲苯（Ⅱ） 2～3 s
（17）中性树胶封固。
注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
染色结果：细胞核蓝色、胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
4．12 切片脱水透明 切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖，。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石碳酸二甲苯进行脱水。石碳酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。
https://blog.sciencenet.cn/blog-266677-248874.html
上一篇：早产儿脑白质损伤的三种病理类型
下一篇：吃果糖过多影响认知功能
