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研究转录因子靶基因的两种方法

已有 17730 次阅读 2014-2-6 11:50 |个人分类:分子遗传|系统分类:科普集锦

转录因子可以影响很多基因的表达,可以指导很多不同的生物学过程,包括细胞分化、细胞分裂、大小、代谢等等。研究转录因子的功能需要多种生物学方法,比较容易给研究者带来希望的技术,我认为,有两种:检测mRNA变化的DNA芯片(chipor microarray)和检测转录因子的DNA结合的染色体免疫共沉淀+DNA芯片(Chip-Chip)。当然了,后来的deep sequencing技术能更好地检测mRNA变化,Chip-Chip有时也就变成了Chip-Seq

但新技术对生物学的影响力有些像看《非诚勿扰》,过了兴奋期以后,就会发现很多不足。DNA芯片技术已经有二十多年历史了,不算是新技术。开始的时候是技术不过关,测出来的mRNA变化不能准确地反映实际细胞内的真实变化。后来技术过关了,还是有很大的局限性:你看到了细胞内mRNA在某个时刻的状况,但还是难以推测过去预测未来,也不知道这些变多变少的基因之间的关系。但这些局限性抹杀不了DNA芯片技术的贡献。如果有好的实验设计,那还是能收集到一些有参考价值的数据的。

如果说mRNA的上上下下看了让人头晕,那染色体免疫共沉淀一度给研究者带来很大的希望。这种技术可以让我们知道转录因子结合在染色体上的位置,例如在某个基因的调节区域。有结合就说明这个基因受这个转录因子的直接调节。把染色体免疫共沉淀和DNA芯片技术偶联以后,就可以知道某个转录因子在整个基因组的结合位点。这个听起来很潇洒,能解决问题。但结果还是让人失望,原因是:很多很多的,如果不是全部的,转录因子与很多基因的调节区域都有结合,有的转录因子甚至与1/3的基因都有结合信号。于是大家都明白了:与DNA结合只是第一次亲密接触,还不是结婚




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