Structural Determinants of Oxidative Stabilization in an Evolved Versatile Peroxidase

多功能过氧化物酶氧化稳定的结构决定因素

来源：ACS CATALYSIS

IF：13.7

摘要： 多功能过氧化物酶（VP）是混杂生物催化剂，分子结构复杂，具有三个催化位点和几种氧化途径。为了提高VP对H2O2的抗性，该酶的突变在酿酒酵母中进行了一系列定向进化和杂交策略。经过五代随机，饱和和结构域突变，以及体内DNA重组，酶氧化不稳定背后的结构决定因素被揭开。为了在活性和稳定性之间建立平衡，将选定的有益突变引入到新的突变中，促进相互作用。共积累了8个突变，在 3000 equiv 的 H2O2 存在和热稳定性向上提高 6°C 的情况下，将蛋白质的半衰期从 3（野生型）增加到 35 分钟。与其他耐受H2O2血红素过氧化物酶的多重结构比对有助于了解新突变在这些酶的整体氧化稳定中可能发挥的作用。