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用于确定合成纤维三糖的纤维二糖磷酸化酶工程

已有 1682 次阅读 2021-11-4 08:30 |系统分类:论文交流

Engineering of cellobiose phosphorylase for the defined synthesis of cellotriose

用于确定合成纤维三糖的纤维二糖磷酸化酶工程

来源:Applied Microbiology and Biotechnology

IF4.813

摘要:

纤维糊精是一种不易消化的低聚糖,作为潜在的益生元引起了食品工业的兴趣。它们通常通过纤维素的部分水解产生,形成具有不同聚合度(DP)的低聚糖的复杂混合物。在这里,我们探讨了纤维三糖作为产品的定义合成,因为这种低聚糖被认为是混合物中最有效的益生元。为此,从纤维二糖和α-D-葡萄糖1-磷酸分别作为受体和供体底物开始,将来自纤维单胞菌uda的纤维二糖磷酸化酶(CBP)和来自纤维素梭菌的纤维糊精磷酸化酶(CDP)评估为生物催化剂。CDP酶被证明可以快速拉长链,使其达到更高的DPs,即使在经过广泛的诱变后也是如此。相比之下,发现CBP的优化变体可将纤维二糖转化为纤维三糖,摩尔产率为73%。最终可溶性纤维糊精混合物(DP2-5)中的纤维三糖含量为82%,从而得到迄今为止纯度最高的纤维三糖产品。有趣的是,该反应甚至可以从葡萄糖作为受体底物开始,这将进一步降低生产成本。






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