Engineering the protein secretory pathway of Saccharomyces cerevisiae enables improved protein production.

改造酿酒酵母的蛋白分泌途径以提高蛋白质产量

来源：PNAS

IF：9.58

摘要：酿酒酵母是目前最重要、应用最广泛的重组蛋白生产宿主之一。为了提高该酵母的蛋白质生产能力，已经有许多策略被应用于该酵母的基因工程改造中，但是酵母的生产力仍然相对较低，而且随着市场需求的增加，识别新的基因靶标是非常重要的，特别是那些与先前识别的靶标有协同作用的靶标。尽管提高了蛋白质产量，但以往的研究很少关注与细胞内蛋白质滞留相关的过程。在这里，我们确定了涉及分泌和运输途径，组蛋白去乙酰化酶复合物和碳水化合物代谢过程的基因靶标，用于酵母蛋白分泌的基因工程改造。特别是对核内体-高尔基体转运的修饰，除了增加蛋白质分泌外，还能有效降低蛋白质的滞留。通过对几个新发现的基因靶点的组合操作，我们发现了一些新的基因靶点提高酵母的蛋白质生产能力超过5倍, 采用补料分批培养最好的工程菌株能产生2.5 g / L的真菌α-淀粉酶，且重组蛋白在细胞内的保留低于10%。