RNAi expression tuning, microfluidic screening, and genome recombineering for improved protein production in Saccharomyces cerevisiae

利用RNAi表达调控，微流体筛选和基因重组技术，改善酿酒酵母中的蛋白质产量

来源：PANS

IF：9.58

摘要：

   在酿酒酵母中使用RNAi技术结合高通量微流体筛选来减弱基因的表达，以此增强细胞中蛋白质的表达。 

   使用直接实验或富集分析辅助表征系统验证引入的RNAi技术，可以确定蛋白质表达的提高。同时发现了具有细胞代谢功能的基因（YDC1，AAD4，ADE8和SDH1），蛋白质修饰和降解（VPS73，KTR2，CNL1和SSA1）和细胞周期（CDC39）在不同的下调水平（RNAi）都可以影响重组蛋白的表达量。

   通过建立包含Cas9介导的重组技术的工作流程，我们展示了如何调整已鉴定基因靶标的表达，以进一步改善蛋白质的产量。

   我们的研究结果提供了高通量和半合成平台设计，不仅可以改善所需蛋白质的生产，更重要的是，可以进一步提高蛋白质生产与其他细胞过程之间的联系。