使用自旋阱α-苯基N-叔丁基硝基酮演示完整犬“昏迷”心肌中自由基的生成

研究表明，氧自由基可能介导缺血后心肌功能障碍（“晕厥”），但该假说的所有证据都是间接的。Bolli使用电子顺磁共振（EPR）光谱和自旋阱，α-苯基N-叔丁基硝基酮（PBN），直接研究30只开胸犬冠状动脉阻断15分钟后再灌注后是否产生自由基。冠状动脉内输注PBN后，在从缺血/再灌注血管床引流的静脉血中检测到以氧和碳为中心的自由基加合物为特征的EPR信号。PBN加合物的心肌释放在冠状动脉闭塞期间开始，但在再灌注后的最初几分钟内显著增加。在该初始爆发之后，自由基的产生减弱但没有停止，在回流后持续3小时。EPR光谱（aHβ=2.67-2.79克，aN=14.75-15.00克）与PBN捕获次级氧和碳中心自由基（如烷氧基和烷基）一致，这些自由基可由初级氧自由基与膜脂反应形成。PBN加合物产生量与缺血血流减少程度之间存在线性直接关系。给予PBN的狗在再灌注后收缩功能的恢复（测量为收缩壁增厚）大于对照组（P小于0.05）。本研究表明，完整动物的可逆性局部心肌缺血与自由基生成时间延长有关，且自由基生成的强度与缺血的严重程度有关。这些结果提供了直接证据，支持活性氧代谢物导致体内短暂缺血后观察到的持续性收缩功能障碍（心肌顿抑）的假设。

Bolli R, Patel BS, Jeroudi MO, et al. Demonstration of free radical generation in "stunned" myocardium of intact dogs with the use of the spin trap alpha-phenyl N-tert-butyl nitrone. J Clin Invest. 1988;82:476–85.