今天和Thermal工程师交流一下，谈到label free定量的问题，我是一直想做这种的，因为简单，线性范围较宽，可以同时比较多个样品。不过工程师不建议我这样做，原因是设备条件要求比较高，例如要用nano liter的色谱泵，商品化的nano column and emmiter，以保证每次进样的重复性。这么说来，我目前的条件还不能做，因为用的是micro liter进样，通过分流达到的纳升进样，这样流速其实很不稳定。其次，我使用手工的毛细管填料柱，手工拉制emmiter，这些硬伤无法保证样品的重复性。
预实验表明，用如此系统，分析重复仅有60%左右的重复结果，若是不同样品进行label free，真是不行的。
如此看来，只能尽量提高标记样品的鉴定率了，标记效率还可以，不用考虑。
另外，磷酸化肽段真是讨厌，总是那么少，用Orbitrap velos也没好多少。
有一段时间了，有点烦乱，是自己的问题。


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