（续上文）

2015年10月中旬华尔街日报连续发表文章质疑 Theranos 的体外诊断技术后，Theranos 及其CEO Holmes本人在不同场合与媒体打起了口水仗。Theranos 在10月22日祭出 6000 字重磅雄文 Theranos Facts, 我一开始被这气势震了一下，莫非它真有价值90亿美元的独门秘技。

慢慢看过来，好像是这样：

迄今为止，Theranos获得FDA批准的唯一一个项目是2015年7月2日获批的 I 型单纯疱疹病毒IgG （HSV-1, herpes simplex 1 virus IgG)的免疫分析。 FDA的这份文件（510(k) Substantial Equivalence Determination Decision Summary, No. K143236）在2015年10月22日的 Theranos Facts 中被反复提及和引用。Theranos 以此证明其技术获得了 FDA 认可，其测试准确性和可靠性不容质疑。

在这份文件上，我终于看到一些除“革命性”、“颠覆性”以及“创新性”（FDA不用这些术语）以外的，从未出现在媒体上的技术关键词。 这些词大致勾画了 Theranos 的 HSV-1免疫分析方法， 也暗示了它未来的其它免疫分析项目的平台技术所可能基于的科学原理。这些技术关键词有以下：

three-step sandwich chemiluminescent immunoassay -- 三步夹心化学发光免疫分析；

qualitative detection -- 定性检测；

glycoprotein G (gG) recombinant antigen coated surface -- 糖蛋白重组抗原包被的固相表面；

Mouse monoclonal antibody against human IgG, conjugated to alkaline phosphatase (AP) -- 碱性磷酸酶（AP）偶联的抗人IgG鼠单抗；

chemiluminescent substrate -- 化学发光底物

尽管我还未在 510(k) 中找到 chemiluminescent substrate（化学发光底物）的化学本质（即哪一个化学发光物质），有了这些关键词，任何一个从事过免疫分析的研究人员都能基本了解 Theranos 的技术平台了，一些人也能猜出它所用的化学发光物质。

让我们再来看一看 Theranos 的510(k) 文件中 HSV-1 IgG 免疫分析的原理描述。原文如下（关注原理的人都能看懂英文，就不翻译了）：

Test Principle:

During the first incubation step, the HSV-1 IgG antibodies present in the positive control and sample bind to the gG recombinant antigen on the coated surface. Following the first incubation step, unbound materials are removed with a wash cycle. Then the detection reagent-AP conjugate is added and during the second incubation step, the detection reagent-AP conjugate reacts with the HSV-1 IgG antibodies already bound to the capture surface. Following the second incubation, unbound materials are removed with a wash cycle. The chemiluminescent substrate is added to the capture-analyte-detection complex during the third incubation step to initiate the chemiluminescence reaction. Light generated by this reaction is detected and analyzed by the Theranos System using a calibration function to determine the cut-off index (COI) values for the sample and controls. The results for the Positive and Negative controls must be within specified limits for a run to be considered valid.

过去有一些人从Theranos申请的专利以及其宣称的几滴血做百十个测试的神功上推测它可能采用了微流控以及多重检测等方法。我于是分别用“microfluidic”, “microfluidics”, “multiplex”, “multiplexing”, “multi-analyte”, “multi-analytes”几个词对29页的 Theranos 510(k) 文件进行了搜索，没有发现 510(k) 文件中有这几个关键词。

进一步关于试剂盒中的材料描述“The Theranos HSV-1 IgG Assay reagents are assembled in a self-contained, ready-to-use pouched cartridge that is sufficient to run one test.”表明，Theranos 获得FDA 批准的是与其特定样本处理和信号检测装置配套的供一次性使用的 HSV-1 IgG 免疫分析试剂。显然，这种设计不是针对中心实验室（centralized laboratories）的全自动免疫分析系统的，而更适合 de-centralized测试环境（即POCT, point-of-care testing)。这也是 Theranos 获得 HSV-1 IgG FDA clearance 后，几乎同时（2015年7月16日）又获得 CLIA Waiver 的原因。

国内投资界以获得的检验项目注册证数目为体外诊断（IVD）公司估值的投资机构可能不明白，仅仅获得了一个 FDA 注册证和一个 CLIA Waiver 的 Theranos 凭什么值90亿美元呢？

关于CLIA（Clinical Laboratory Improvement Amendments）以及 Theranos Facts 中提到的Laboratory Developed Tests (LDTs) 等法规概念以后再谈。从唯一能获得的载有一点技术内容的 510(k)看，Theranos 没有在其唯一一个获得 FDA 注册证的 HSV-1 IgG 免疫分析项目上展示出任何非传统的科学和技术元素，或者这些元素的新的组合方式。但在其 6000 字的 Theranos Facts 雄文中， 反复引用这唯一一份 FDA clearance，仿佛媒体关注的、涉及 Theranos 开展的二百多个检验项目的一切答案都在其中。但即使是免疫分析项目基于抗体/抗原特异性结合这一基本过程，其它检验项目的建立，及其有效性、可靠性是不能被一个项目所获得的 clearance 所代表的。

从抽取血样到检测报告送到医生或患者手上，完成一个体外诊断项目的测试有多个步骤。大多数质疑 Theranos 技术的人关注的是样品如何被分析，而不是样品如何被采集。但看来目前 Theranos 强调的核心技术是指尖采血以及用指尖血来代替静脉血。那么指尖采血是多大的革命，指尖血又能在多大程度上代替静脉血呢？