实验的成功率很重要，而要提高成功率，就必须注意细节。以下是做实验需要注意的五大细节：

 

一，记录

 

人的记忆力是有限的，在做实验的时候，不可能记住做过的每一步。例如实验记录如果不及时写，第二天就会忘记很多，一周之后就完全忘记了。所以做实验一定要做好实验记录。记录一要及时，否则就会忘记，最好是随时记录。二要详细，因为一个很小的细节可能就是实验失败或者成功的原因，如果没有记下这个细节，实验出问题了就难以找到原因。例如，做实验用的试剂是哪一瓶，什么时候配的（尤其是容易失效的试剂），如果是用PBST配的5%BSA，加了0.02%的Sodium Azide抑制微生物生长，就应该记录为5%BSA.PBST.N3Na，而不是5%BSA。三要整洁，如果过于潦草，看起来很不方便，需要找相关信息的时候就难以找到。配好的试剂做好标签也是一种记录，标签一定要详细：包括试剂名称、配置日期、配置者及其它必要信息。在配试剂的时候，为了防止忘记贴标签的情况，应该先贴标签，再加试剂。电子记录有易于检索的优点，对于某些重要信息，可以记录到电子文档（例如word文档）里面。

 

二，核查

 

很多时候，我实验失败的原因是没有仔细核查，例如没有核查果蝇的表型，没有仔细检查试剂的标签，没有核查离心机的转速，没有检查heat block的温度等等。每一个小错误都可能导致实验失败，所以一定要养成仔细核查的习惯。具体来说，在加试剂的时候，一定要仔细核查标签（包括试剂名称、配置日期），是否有沉淀，颜色是否改变等；使用仪器的时候，要核查设置，例如温度、转速、时间设置等；电泳的时候，要核查是否有气泡冒出；使用实验动物的时候，要核查表型等。

 

三，分装

 

谚语说：不要把所有鸡蛋都放到同一个篮子里。同样，在做实验的时候，有时也不要把所有试剂都放到同一个容器里。分装有很多好处。第一，保险。可以防止因为污染、变质等原因损失全部试剂或者样品。第二，容易混匀。结冰的试剂需要全部溶解然后vortex才可以混匀，如果很大体积，有时会等不及全部溶解就开始加样，会导致浓度不均。一般溶液都是先溶解溶质浓度高的，就像是结冰的汽水一边融化一边喝，一开始很甜，最后几乎没有甜味了，是因为糖份的存在会降低熔点，含糖量高的先溶解了。分装后，每一管溶液量小，解冻时容易全部溶解。注意在分装的时候一定要全部溶解并充分混匀。第三，延长保质期。很多试剂都要低温保存。如果不分装，每次使用的时候都全部受热一次，变质就会很快。分装之后，每次使用只有少量试剂受热，其它的还可以继续保持于低温，可以延长使用寿命。抗体、体积较大的酶、热不稳定的其它试剂等最好分装保存于-20度或者更低的温度。

 

四，混匀

 

实验对很多试剂的用量都有明确要求。要保证实验的成功和可重复性，必须保证试剂用量一致。用量等于体积乘以浓度，如果溶液不混匀的话，浓度就会不同，即使加样体积一样，实际的量也可能不一样。所以，一定要保证试剂是充分混匀。结冰的试剂，必须完全溶解才可以使用。容易沉淀的试剂，使用之前必须充分vortex后再快速离心一下才能使用。

 

五，备份

 

在《At the bench》一书里，作者说如果实验室发生起火等危急情况，首先应该抢救的不是试剂，而是实验记录。因为有了实验记录才可以完成论文。其实，为了防止实验记录丢失的情况，可以把实验记录扫描为PDF文档以备份。同时，对于重要的研究数据，最好整理成电子文档例如excel或word文档，并且养成对自己的电脑文件定期备份的习惯。此外，质粒、转化后的细菌也需要备份。最好备份两份以降低丢失的概率。

六，顺序

有时候需要给很多试管加不同的试剂。这么多试管和试剂，一不小心，就会忘记哪一管或者哪一样试剂加了没有。即使是只有两三个试管，我有时候加了一个样品，忽然就忘记是加了哪一管了。如果是按字母或者数字顺序加样的话，在这种情况下，就会清楚是加了哪一管。

具体来说，给试管加样的时候，按照试管的字母顺序，数字顺序排列。例如做同一个质粒的酶切，用了四种酶，分别是XbaI，KpnI，BamHI，BsteII，就按照从左至右分别为BamHI，BsteII，KpnI， XbaI的顺序排列。把要加的试剂写在纸上，按照从上至下，从左至右的顺序加样。对于同一个试剂，加一管，就把试管往左、右或者上、下移动一格。电泳时，不同的泳道顺序为marker、control、实验组。如果有多个marker或者control，也按照字母或者顺序排列。收集样品时，按照先时间顺序，后字母、数字顺序排列样品。

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