从PC:膜片钳到NMT:非损伤微测技术

---活体研究智能传感技术的演进

（2）时间与空间

时间分辨率和空间分辨率，指的是一个检测技术能够在时间和空间上提供的最小分辨单位或数值。列文虎克(Anthony Von Leeuwenhoek)发明的能够看到活细胞的显微镜，就是在人类观察世界的空间分辨率上的一次大的提升。 

膜片钳技术之所以能够在90年代获得诺贝尔奖，一个很重要的原因就是它将人类对世界的感知能力，在时间分辨率上提升到毫秒级别，在空间分辨率上细小到微米级以下（请见下表），而且是对生物活体进行检测。

(非损伤微测技术与膜片钳及荧光等化学技术在时间空间分辨率上的区别。来源于旭月研究院 http://xbi.org)

１）时间

（膜片钳技术典型数据图。来源于网络） 

膜片钳技术可以轻而易举地捉捕到毫秒级（ms）的离子通道的开放和关闭。这点让依靠反应时间最快也需要秒级的NMT离子分子传感器的非损伤微测技术望尘莫及。即使有的NMT分子传感器，比如O2传感器反应速度可以达到0.8秒（800ms），但面对离子通道的开关研究也无能为力。

（非损伤微测技术典型数据图。来源于网络）

然而，如果我们的科研需要几十分钟，几小时，甚至几十小时地跟踪研究活体材料的离子/分子活动，非损伤微测技术的时间方面的优势就体现了出来。因为只要科研人员有办法保持样品的活性，由于NMT传感器不和被测材料进行接触，所以时间上对非损伤微测技术就不是一个制约因素。有时即使NMT流速传感器在实验过程中失效了，或不小心损坏了，没有关系，马上换上一个好的传感器就是了，只要你的样品还正常就没有问题。

 ２）空间

膜片钳技术通过全细胞等多种灵活的记录方式（见下图），极大地丰富了膜片钳与被测材料之间的空间关系，但是由于该技术对玻璃电极与材料之间高阻封接的必须要求，使得膜片钳技术对于大于微米材料的操作显得力不从心。 

（膜片钳技术的多种测量构形。来源于网络）

非损伤微测技术由于不需要接触被测材料，因此在被测材料的选择，特别是材料大小上面，相比膜片钳就有了非常大的自由度（见下图）。比如，最近面市的‘NMT活体生理检测仪’可以检测从微生物群体，一直到小型个体（如斑马鱼）的各种大小材料离子/分子的进出情况。

（非损伤微测技术可以测试的各种活体材料举例。来源于旭月研究院 http://xbi.org ）

膜片钳与非损伤微测技术在时间和空间分辨率上面各有千秋，可以根据科研需要进行合理选择。有时也可以联合应用则能够更加说明问题，不但两者在时间和空间上可以相互印证，而且非损伤微测技术所测得的离子信号是除离子通道在内，还包含有离子载体和转运体等多种离子运输载体的共同贡献。同时还有多糖吸附，细胞或组织表面的电化学作用，以及各种离子分子相互影响的物理，生物和化学的综合作用的结果。因此也是更加贴近真实的生理状态的结果。

还有就是我们可以人为设计这些样品的检测环境，使其更加接近它们真正的活体状态。别忘了，毕竟您手中握有的是非损伤微测技术！   

3）引发的其它联想

这里有很多时候没有引起生命科学工作者足够重视的两个地方：

1.     生物体是多维的立体空间结构，生命活动和生理现象发生在不同的时间尺度

2.     每一项技术都有其在时间分辨率和空间分辨率上的特色或极限

 具体而言：

1.     生物体是多维的立体空间结构，生命活动和生理现象发生在不同的时间尺度

随着60年代DNA概念的提出，80年代生物化学的迅速崛起，90年代分子生物学的风靡全球，到近些年各种组学的盛行，科学界一部分人似乎认为只要搞定生命的各种组成成份，就可以解决人类的生老病死等等一切问题了。

然而，半个世纪之后，人们终于承认人类寻找癌症等病魔的开关基因是不存在的。前一段时间，某些企业想通过基因序列为社会提供疾病/健康预测的服务尝试，也被以美国FDA为首的各国医药管理部门叫停，原因就是这些静态成份数据不足以支持建立基因组成与各种疾病之间的必然联系。

也就是说，忽视生物体的在时间和空间上多维度的特点，所得到的结果也必然不能够反映生命活动的根本真实面目，其衍生的各类实际应用也必然是空中楼阁。

2.     每一项技术都有其在时间分辨率和空间分辨率上的特色或极限

也正是由于相当一段时间以来，以生物化学，分子生物学和现在的各种组学为代表的，在生物体成份研究为主导的学科教育和科研大环境下，使得很多从事生命科学研究工作的朋友们，对于某一项技术的时间和空间分辨率定位不是很敏感。

现实是，如图5所示，当NMT非损伤微测技术告诉你，它所涵盖的时间和空间分辨率既不同于膜片钳技术，也有别于其它荧光和放射性物质技术的时候，你的眼睛是否豁然一亮，因为在你面前出现了一个崭新的、宽阔无垠的科研蓝海！道理很简单，就是你将揭示前人从未涉足的生命现象领域，就像当年的列文虎克一样。

<未完待续>

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参考文献

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1) 旭月研究院网站 http://xbi.org

2)     美国扬格公司网站：http://youngerusa.com

3)     印莉萍, 上官宇, 许越. 非损伤性扫描离子选择电极技术及其在高等植物研究中的应用. 自然科学进展. 2006, 16(3):262-266.

4)     丁亚男,许越.非损伤微测技术及其在生物医学研究中的应用.物理. 2007, 36(7): 548-558.