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虽然做Nissl staining有几次,但近期做却犯了一个错误。为了省事,用了Fisher Scientific 的Superfrost Plus的玻片(正电荷防脱载玻片),据说黏附性很好,同事曾做过Aβ plaque的thisflavin S 染色,效果不错。但尼氏染色后脱片情况却较严重,事实明胶包裹玻片能很好解决脱片问题:
1. 配置明胶溶液
- Gelatin(明胶) 2.5 g
- Chromium Potassium Sulfate 【CrK(SO4)2 】(硫酸铬钾) 0.25 g
- ddH2O to 500 ml
note:先用60℃以上的热水溶解明胶,等水凉后再溶解硫酸铬钾
2. 清洗玻片
如果买的是商品化的玻片,不一定需要严格清洗,可以用商品化的玻片(Brain Research Laboratories)。
3. 明胶包裹玻片
浸入明胶中15min,拿出后放入温箱(50℃左右)中烘干。
玻片放入-20℃冰箱中永久存放。
4. 脑片黏贴玻片,hood中晾干
5. Nissl 染色前将玻片放入PBS中5min(湿润后有助于染色),ddH2O 30s, 去除表面的水分。
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GMT+8, 2024-4-27 08:13
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