肝细胞癌（HCC）是全球癌症相关死亡的第四大原因，其治疗面临着高传播率、转移和复发以及治疗效果不佳等挑战。尽管目前已有如索拉非尼和雷格拉非尼等药物提高了HCC患者的生存率，但这些药物存在时效短、药物耐药等问题。因此，寻找安全、高效、低毒性且能逆转药物耐药性的新药物变得迫切。牛樟芝（Antrodia cinnamomea）已被证明具有抗肿瘤、保护肝脏、调节免疫等多种生理活性，尤其在抗HCC方面效果显著。然而，牛樟芝的主要作用及其抗HCC的机制尚未完全阐明。这项发表在Acta Pharmaceutica Sinica B（IF=14.5）上，题为“Antrodia cinnamomea exerts an anti-hepatoma effect by targeting PI3K/AKT-mediated cell cycle progression in vitro and in vivo”的研究中，研究人员系统地分析了牛樟芝滴丸（ACDPs）的化学成分，并通过网络药理学和生物信息学方法揭示了其潜在的抗HCC作用机制。

主要研究结果

1. ACDP活性成分的预测和富集分析结果

首先，在瑞士ADME数据库中检索ACDP中的化合物。结果显示共有72个活性成分，胃肠道吸收率高，药效适宜。Swiss Target Prediction用于预测化合物的目标，并构建成分-目标网络。同时，下载ACDP已验证目标的信息，并对重复目标进行合并。GO富集分析显示ACDP的靶点与ERK1和ERK2级联的正调节、炎症反应、凋亡过程的负调节、细胞增殖的正调节等密切相关。KEGG通路富集分析表明，ACDP的靶点在癌症、乙型肝炎、FoxO信号通路、胰岛素抵抗等通路中显着富集。

2. ACDPs通过PI3K/AKT/细胞周期轴在体外抑制HCC细胞的增殖

为了进一步验证ACDP对HCC（细胞的作用，我们选择培养了HepG2、Huh-7和SMMC-7721这三种人类肝癌细胞系。我们使用CCK-8测定法来评估ACDP对细胞活力的影响，将细胞与不同浓度的ACDP（0、0.4、0.8、1.6和3.2 mg/mL）预处理24或48小时。研究结果显示随着ACDP浓度的增加和处理时间的延长，HCC细胞活力被显著抑制。集落形成实验的结果支持了这一发现，并进一步证实了ACDP在体外具有抗肝癌的活性，这与CCK-8测定的结果相一致。接下来，通过EdU测定法确认了ACDP对细胞增殖的抑制作用。此外，信息学结果显示ACDP可能通过调节PI3K/AKT信号通路来影响细胞周期相关蛋白的表达。为了验证这一假设，我们对Huh-7细胞进行了Western blot检测，以评估cyclin E1和CDK1这两种蛋白在ACDP刺激后的表达变化。结果显示，它们的表达量在ACDP处理后显著减少。此外，我们还观察到ACDP处理导致裂解的半胱天冬酶8的表达增加，这表明ACDP可能促进了细胞凋亡。同时，Western blot分析还表明，ACDP降低了PIK3CA的表达，并且减弱了AKT的活性。综上所述，我们的研究结果表明，ACDPs通过调节PI3K/AKT信号通路，影响细胞周期进程，并可能促进细胞凋亡，从而在肝细胞癌中发挥抗癌作用。

本文总结：

本研究利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）技术，首次在ACDPs中鉴定出139个化学成分，包括102个萜类化合物、8个苯类化合物、2个嘌呤核苷和27个其他类别化合物。通过网络药理学分析，发现ACDPs的活性成分显著富集在与细胞增殖调控密切相关的癌症通路中。进一步的生物信息学分析揭示了79个HCC生物标志物，并通过分子对接预测了ACDPs活性成分与这些靶点之间的亲和力。最终，体内和体外实验表明ACDPs能够通过降低PI3K/AKT信号通路的活性和下调细胞周期相关蛋白的表达，从而抑制肝癌细胞的生长。这一发现为开发新的抗HCC药物提供了科学依据。未来的研究需要进一步验证这些发现，并探索牛樟芝在临床治疗HCC中的应用潜力。

参考资料：

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8897033/