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肿瘤细胞培养实验过程中经验总结
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过完年，回到实验室就开始一直跟着楼上的同学学习细胞培养的基本技术，经过一个月的观摩和操作，终于逐渐上手并熟练操作。期间，一切的一切都是白手起家，先是联系中科院上海细胞所，购买细胞，在这里有必要提一下，接电话的工作人员态度一点都不热情，一种爱理不理的样子，还没等咨询完就着急挂电话，好像我浪费了她电话费，耽误了她工作似的，很让人抓狂！言归正传，接着联系细胞培养瓶和96孔板，这两家的态度都是特好，有什么问题都及时解决，售后服务超好，瓶子的包装非常细致，总之，一切感觉都是那么的舒服！这或许就是体制内与体制外的区别！
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由于细胞太珍贵，刚开始分瓶都是同学代替，我都是在一边观摩，等冻存一两管细胞之后便开始我的培养细胞之旅！
一、细胞培养瓶的清洗：首先，置于清洁液的大箱子里浸泡一夜，之后刷干净之后，捞出来泡酸一夜，把酸冲干净后，用自来水冲洗15次，控干，用双蒸水润洗两三次左右，烘干，包扎瓶口，160℃干热灭菌4h。玻璃吸管和移液管的前期处理一致，后期用湿热灭菌30min。
二、操作之前，先用紫外灯照射净化台30min，之后打开吹风，在酒精等附近进行操作。这里需要特别注意的是，一定要保持净化台整洁，吸管都要标好标签，这样在操作过程中不会因为一时疏忽造成实验事故，在进行实验室，手机最好关机或放在操作室外面，以防电话的干扰。
三、在试验中遇到问题时，一定不要着急，要像剥洋葱一样，层层分析，寻找答案。在细胞培养过程中，由于我用的是结肠癌细胞，容易在培养中出现“抱团”的现象，我们纠结了好久，用EDTA也不好使，最后，无意中发现一种EDTA和胰蛋白酶混合的试剂，加上之后，效果奇佳，抱团现象没有了，并且生长的速度也增加了不少，节省了大量时间。
2012.4.4由于细胞生长状态奇佳，实验进入正轨，也不枉费我这一个多月的辛勤劳动，特以此纪念！
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