测试erastin和SAS的致死作用机制是否受到细胞生长结构的影响。具体来说，测试了铁死亡致死机制是否可以在多细胞肿瘤球体 (MCTS) 中被激活，MCTS 是一种三维细胞聚集体，旨在概括在肿瘤碎片和微转移中观察到的结构和代谢异质性的关键方面。从 HT-1080 和 Calu-1 细胞中培养 MCTS 72 小时，然后研究了erastin +-beta-ME 或 +-Fer-1 对 MCTS 生长和活力的影响。为了比较，还测试了 RSL3的生长抑制作用，这是一种通过抑制 GPX4 触发铁死亡的小分子，GPX4 位于铁死亡级联系统 xc- 的下游，以及星形孢菌素（STS)，它触发细胞凋亡。观察到 HT-1080 和 Calu-1 MCTS 被erastin 和 RSL3 杀死。 fer-1 挽救了erastin 和RSL3 的作用，而β-ME 抑制了erastin 的杀伤力，但不是RSL3，正如预期的那样（。 β-ME 和 Fer-1 均未调节 STS 对 MCTS 生长或活力的影响。这些观察结果表明，erastin 和 RSL3 能够在二维和三维培养条件下以类似的方式触发铁死亡。