Improved Homologous Expression of the Acidic Lipase from Aspergillus niger

黑曲霉酸性脂肪酶同源表达的改进

来源：JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY

IF:2.351

摘要：在这项研究中，来自黑曲霉 (ANL) 的酸性脂肪酶在黑曲霉中同源表达。通过表达带有内含子的天然ANL、添加Kozak序列和优化信号序列，ANL的表达得到显着提高。当在黑曲霉中gpdA启动子下表达与glaA信号融合的ANL的cDNA序列时，检测不到脂肪酶活性。然后我们尝试通过使用包含三个内含子的全长ANL基因来提高表达，并且上清液中的脂肪酶活性达到75.80 U/ml，可能是更稳定的mRNA结构的结果。由于更高的翻译效率，通过在起始密码子周围引入 Kozak 序列，表达进一步提高到 100.60 U/ml。最后，评估了包括 cbhI 信号、ANL 信号和 glaA 信号在内的三个信号序列对脂肪酶表达的影响。具有 cbhI 信号的转化体显示出最高的脂肪酶活性 (314.67 U/ml)，分别比具有 ANL 信号和 glaA 信号的转化体高 1.90 倍和 3.13 倍。酸性脂肪酶被表征，其最高活性在 pH 3.0 和 45 摄氏度的温度下检测到。这些结果为从黑曲霉生产酸性脂肪酶提供了有希望的策略。