Engineering enhanced cellobiohydrolase activity

工程改造提高纤维水解二糖的活性

来源：Nature Communications

IF：12.353

摘要：糖苷水解酶家族7纤维二糖水解酶（GH7 CBHs）催化纤维素分解真核生物中的纤维素解聚，使其成为关键的发现和工程目标。但是，这些工业上重要的纤维素酶仍然缺乏牢固的构效关系。本文比较了来自里氏木霉（TrCel7A）和青霉（PfCel7A）的CBHs，它们显示出由催化域（CD），碳水化合物结合模块和接头组成的多模块结构。数据表明PfCel7A在生物量上比TrCel7A表现出60％更高的性能。为了了解每个域对这种改进的贡献，测量了具有交换子域的CBH嵌合体文库的酶促活性，表明增强作用主要是由PfCel7A CD引起的。随后解析了PfCel7A CD的晶体结构，并使用此信息创建了TrCel7A CD突变体的第二个文库，从而确定了与野生型PfCel7A具有几乎等效活性的TrCel7A双突变体。总体而言，这些结果揭示了CBH区域能够实现有针对性的活动改善。