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二代和三代测序平台助力解析南极蠓基因组挖掘其适应极端环境机制

已有 3883 次阅读 2014-9-4 16:33 |个人分类:动物基因组测序研究进展|系统分类:科研笔记| 南极蠓, 南极蠓基因组, 二代和三代测序, 极端环境适应

Belgica antarctica,南极蠓是唯一生活在南极洲的昆虫,其独特的抗低温环境,抗冰冻刺激,抗脱水及渗透胁迫,抗强紫外辐射等特点,使其成为挖掘抗极端环境遗传机制的有力研究对象。

南极蠓基因组研究成果于2014年8月12日发表在nature communication期刊上,其是南极首个基因组被测生物,也是双翅目摇蚊科中第一被测序的极端生境生物。南极蚊基因组大小约99Mb,是目前所测昆虫基因组中最小的。尽管南极蠓和其他双翅目生物一样具有差不多的基因数量,但是其与其他双翅目昆虫相比具有很低的重复密度、内含子长度减少的现象。极端环境似乎是对基因组结构存在约束、而非对基因组成造成影响。转座子数目较少且大多是比较古老的、没有活性的反转座子序列。基因组中大量基因信息是和生长发育、代谢调控、极端环境袭击应答等相关的,从而能够解析其适应机制。


南极蠓基因组测序平台:结合了二代测序平台HiSeq 2000和三代测序平台PacBio RS II。

测序策略:

1)RNA-Seq:pooled the fourth larval instar larvae;

2)基因组HiSeq测序:构建一个~400bp shotgun文库结合HiSeq 2000测序一个lane,测序深度达100×以上,结合这部分数据进行基因组大小评估等;这部分数据结合Velvet进行denovo组装,获得5,422 contigs;然后再结合ERANGE将RNA-Seq数据对contigs进行拼接、将contigs缩减至 5,064个。

3)基因组PacBio测序:构建一个~10Kb大小的文库结合PacBio RS II进行测序。

*DNA源自同一个南极蠓个体。

4)数据组装:

5)南极蠓基因组组装结果:

6)基因组注释:首先是对转座子等重复序列进行了注释统计,然后再进行基因组注释;

7)基因组比较分析:和冈比亚按蚊、埃及伊蚊、库蚊、果蝇基因组进行比较分析;

8)功能富集分析:GO富集;

9)Putative SNPs鉴定:这是将trimmed reads比对回组装结果时鉴定获得;

10)Demography分析。


附:蚊类物种基因组测序信息汇总-20140904.xls


genomeweb报道:Compact Antarctic Midge Genome Offers Clues to Extreme Adaptation

生物帮报道:Nature Com:南极蠓的紧凑型基因组可能是为了适应极端环境

文章下载:Compact genome of the Antarctic midge is likely an adaptation to an extreme environmentCompact genome of the Antarctic midge is likelyan adaptation to an extreme environment.pdf

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